中国动物检疫
中國動物檢疫
중국동물검역
Chinese Journal of Animal Health Inspection
2015年
10期
72-75,88
,共5页
王勇%南文龙%巩明霞%张悦勇%彭大新%陈义平
王勇%南文龍%鞏明霞%張悅勇%彭大新%陳義平
왕용%남문룡%공명하%장열용%팽대신%진의평
布鲁氏菌%重组蛋白%间接ELISA%适用性
佈魯氏菌%重組蛋白%間接ELISA%適用性
포로씨균%중조단백%간접ELISA%괄용성
Brucella%recombinant proteins%indirect ELISA%applicability
为比较布鲁氏菌蛋白BP26、OMP16、CP39、SP41、eryC作为间接ELISA检测用抗原的适用性，本研究原核表达并纯化了这5种蛋白，分别以其作为包被抗原，对反应条件进行优化，建立了布鲁氏菌病5种血清抗体间接ELISA检测方法。结果显示，重组蛋白BP26、OMP16、CP39、SP41、eryC大小分别约为32 ku、21 ku、30 ku、51 ku和38 ku，均可被布鲁氏菌阳性血清所识别，具有良好的免疫反应性。利用5种重组蛋白作为包被抗原建立的间接ELISA方法，与牛结核、牛病毒性腹泻等常见牛病阳性血清之间无交叉反应；对28份阴、阳性参考血清进行检测，以BP26作为包被抗原建立的间接ELISA P/N值最高。利用建立的方法和IDEXX试剂盒对48份临床血清样品进行平行检测，重组蛋白BP26、OMP16、CP39、SP41、eryC相应ELISA方法的符合率分别为87.5%、87.5%、89.6%、85.4%、79.2%。结合敏感性、特异性等因素综合分析，以重组蛋白BP26作为检测抗原建立的间接ELISA方法效果较为理想，可适用于临床布鲁氏菌感染的检测。
為比較佈魯氏菌蛋白BP26、OMP16、CP39、SP41、eryC作為間接ELISA檢測用抗原的適用性，本研究原覈錶達併純化瞭這5種蛋白，分彆以其作為包被抗原，對反應條件進行優化，建立瞭佈魯氏菌病5種血清抗體間接ELISA檢測方法。結果顯示，重組蛋白BP26、OMP16、CP39、SP41、eryC大小分彆約為32 ku、21 ku、30 ku、51 ku和38 ku，均可被佈魯氏菌暘性血清所識彆，具有良好的免疫反應性。利用5種重組蛋白作為包被抗原建立的間接ELISA方法，與牛結覈、牛病毒性腹瀉等常見牛病暘性血清之間無交扠反應；對28份陰、暘性參攷血清進行檢測，以BP26作為包被抗原建立的間接ELISA P/N值最高。利用建立的方法和IDEXX試劑盒對48份臨床血清樣品進行平行檢測，重組蛋白BP26、OMP16、CP39、SP41、eryC相應ELISA方法的符閤率分彆為87.5%、87.5%、89.6%、85.4%、79.2%。結閤敏感性、特異性等因素綜閤分析，以重組蛋白BP26作為檢測抗原建立的間接ELISA方法效果較為理想，可適用于臨床佈魯氏菌感染的檢測。
위비교포로씨균단백BP26、OMP16、CP39、SP41、eryC작위간접ELISA검측용항원적괄용성，본연구원핵표체병순화료저5충단백，분별이기작위포피항원，대반응조건진행우화，건립료포로씨균병5충혈청항체간접ELISA검측방법。결과현시，중조단백BP26、OMP16、CP39、SP41、eryC대소분별약위32 ku、21 ku、30 ku、51 ku화38 ku，균가피포로씨균양성혈청소식별，구유량호적면역반응성。이용5충중조단백작위포피항원건립적간접ELISA방법，여우결핵、우병독성복사등상견우병양성혈청지간무교차반응；대28빈음、양성삼고혈청진행검측，이BP26작위포피항원건립적간접ELISA P/N치최고。이용건립적방법화IDEXX시제합대48빈림상혈청양품진행평행검측，중조단백BP26、OMP16、CP39、SP41、eryC상응ELISA방법적부합솔분별위87.5%、87.5%、89.6%、85.4%、79.2%。결합민감성、특이성등인소종합분석，이중조단백BP26작위검측항원건립적간접ELISA방법효과교위이상，가괄용우림상포로씨균감염적검측。
In order to compare the applicability of different coating antigens in indirect-ELISA(iELISA)for detecting Brucella antibodies,BP26,OMP16,CP39,SP41and eryC ofBrucella were expressed with prokaryotic system,purified and used as coating antigens respectively in iELISA assays and their effects were compared. The results showed the expressed recombinant BP26,OMP16,CP39,SP41and eryC were about 38 ku,21ku,30ku,51ku and 38ku respectively, and all of them were recognized byBrucella positive serum. All the five iELISA assays had no cross-reactivity with bovine tuberculosis or bovine viral diarrhea sera. Detection of 28 reference serum samples showed that the iELISA with BP26 as coating antigen had the highest P/N value. A parallel detection of 48 clinical serum samples was carried out, and compared to the results of commercial kits(IDEXX),the agreements were 87.5 % for BP26-iELISA,87.5 % for OMP16-iELISA,89.6 % for CP39-iELISA,85.4 % for SP41-iELISA and 79.2 % for eryC-iELISA. In conclusion,the effect of BP26 used as antigen in iELISA was relatively ideal.
