江苏农业学报
江囌農業學報
강소농업학보
Jiangsu Journal of Agricultural Sciences
2015年
5期
971-974
,共4页
常丽娟%宋君%雷绍荣%尹全%王东%刘文娟%张富丽
常麗娟%宋君%雷紹榮%尹全%王東%劉文娟%張富麗
상려연%송군%뢰소영%윤전%왕동%류문연%장부려
转基因玉米%结构特异性%实时荧光定量PCR%灵敏度%准确度
轉基因玉米%結構特異性%實時熒光定量PCR%靈敏度%準確度
전기인옥미%결구특이성%실시형광정량PCR%령민도%준학도
genetically modified maize MIR604%structure-specificity%sensitivity%accuracy
根据转基因玉米 MIR604外源载体序列,设计引物和探针,并优化反应体系和热循环条件,建立了MIR604结构特异片断实时荧光定量PCR检测方法。采用该方法对6种非转基因作物、MIR604及其他非目标转基因作物进行检测,除MIR604外,其余样品均未检测到MIR604分子片段的扩增信号;对含量为1%的MIR604标准品进行定量检测,测试样品平均含量为1.05%;灵敏度测试结果显示该方法能检测到仅5个拷贝的MIR604分子片段。因此,本研究建立的方法具有较高的特异性、准确度及灵敏度,能为中国转基因生物安全监管提供技术支持。
根據轉基因玉米 MIR604外源載體序列,設計引物和探針,併優化反應體繫和熱循環條件,建立瞭MIR604結構特異片斷實時熒光定量PCR檢測方法。採用該方法對6種非轉基因作物、MIR604及其他非目標轉基因作物進行檢測,除MIR604外,其餘樣品均未檢測到MIR604分子片段的擴增信號;對含量為1%的MIR604標準品進行定量檢測,測試樣品平均含量為1.05%;靈敏度測試結果顯示該方法能檢測到僅5箇拷貝的MIR604分子片段。因此,本研究建立的方法具有較高的特異性、準確度及靈敏度,能為中國轉基因生物安全鑑管提供技術支持。
근거전기인옥미 MIR604외원재체서렬,설계인물화탐침,병우화반응체계화열순배조건,건립료MIR604결구특이편단실시형광정량PCR검측방법。채용해방법대6충비전기인작물、MIR604급기타비목표전기인작물진행검측,제MIR604외,기여양품균미검측도MIR604분자편단적확증신호;대함량위1%적MIR604표준품진행정량검측,측시양품평균함량위1.05%;령민도측시결과현시해방법능검측도부5개고패적MIR604분자편단。인차,본연구건립적방법구유교고적특이성、준학도급령민도,능위중국전기인생물안전감관제공기술지지。
A structure-specific quantitative PCR technique for the detection of genetically modified maize MIR604 was developed in this study to provide supports for genetically modified organism safety supervision in China by optimizing reaction system and thermal cycling condition. Six kinds of non-genetically modified crops, MIR604 and other non-target transgenic crops were detected. The fluorescent signal was only detected in MIR604. The measured value of 1% MIR604 was 1. 05%. The sensitivity experiment revealed the method could detect only 5 copies of MIR604 molecular fragments. In conclusion, the structure-specific quantitative PCR detection method for genetically modified maize MIR604 is of high spe-cificity, accuracy and sensitivity.