中国兽医杂志
中國獸醫雜誌
중국수의잡지
Chinese Journal of Veterinary Medicine
2015年
9期
25-27
,共3页
古洪浪%梁焕斌%纪方晓%周沛%邓胜朝%曹振鹏%王衡%张桂红
古洪浪%樑煥斌%紀方曉%週沛%鄧勝朝%曹振鵬%王衡%張桂紅
고홍랑%량환빈%기방효%주패%산성조%조진붕%왕형%장계홍
猪戊型肝炎病毒%ORF2基因%原核表达%抗原表位
豬戊型肝炎病毒%ORF2基因%原覈錶達%抗原錶位
저무형간염병독%ORF2기인%원핵표체%항원표위
为了初步鉴定猪戊型肝炎病毒(swHEV)ORF2蛋白的抗原表位,通过设计两对引物,PCR扩增ORF2-1和ORF2-2两段基因片段,使用pMD 18-T载体克隆,双酶切后构建重组质粒pET32a-0RF2-(1,2),转化大肠杆菌BL21后进行IPTG诱导和SDS-PAGE凝胶电泳,最后用4株ORF2单抗对其进行Western Blot来初步鉴定其抗原表位.结果表明,分别获得约为36 ku和35 ku的两个目的蛋白,均以不可溶形式存在,抗原表位初步定位于ORF2-1这段蛋白中的414～523 aa.
為瞭初步鑒定豬戊型肝炎病毒(swHEV)ORF2蛋白的抗原錶位,通過設計兩對引物,PCR擴增ORF2-1和ORF2-2兩段基因片段,使用pMD 18-T載體剋隆,雙酶切後構建重組質粒pET32a-0RF2-(1,2),轉化大腸桿菌BL21後進行IPTG誘導和SDS-PAGE凝膠電泳,最後用4株ORF2單抗對其進行Western Blot來初步鑒定其抗原錶位.結果錶明,分彆穫得約為36 ku和35 ku的兩箇目的蛋白,均以不可溶形式存在,抗原錶位初步定位于ORF2-1這段蛋白中的414～523 aa.
위료초보감정저무형간염병독(swHEV)ORF2단백적항원표위,통과설계량대인물,PCR확증ORF2-1화ORF2-2량단기인편단,사용pMD 18-T재체극륭,쌍매절후구건중조질립pET32a-0RF2-(1,2),전화대장간균BL21후진행IPTG유도화SDS-PAGE응효전영,최후용4주ORF2단항대기진행Western Blot래초보감정기항원표위.결과표명,분별획득약위36 ku화35 ku적량개목적단백,균이불가용형식존재,항원표위초보정위우ORF2-1저단단백중적414～523 aa.
