中华实验外科杂志
中華實驗外科雜誌
중화실험외과잡지
Chinese Journal of Experimental Surgery
2015年
10期
2510-2513
,共4页
唐洪%刘俊利%朱长宝%王富友%杨柳
唐洪%劉俊利%硃長寶%王富友%楊柳
당홍%류준리%주장보%왕부우%양류
碳化二亚胺%毒性%交联%胶原蛋白
碳化二亞胺%毒性%交聯%膠原蛋白
탄화이아알%독성%교련%효원단백
1-ethyl-3-3-dimethyl-aminopropyl carbodiimide%Toxicity%Crosslink%Collagen
目的 对碳化二亚胺(EDAC)的生物安全性,探讨其作为交联剂是否有毒.方法 取3只健康的大白兔,皮内注射浓度为1％和2％的EDAC生理盐水溶液200μl,于2、4、24、48 h和1周观察皮肤有无水肿、红斑,计算原发刺激指数,判断皮肤刺激反应类型;取20只健康的昆明小鼠,按照10μl/g腹腔注射2％的EDAC,于4、8、12、24和48 h观察小鼠有无轻、中、重度毒性反应和死亡;用浓度为0.4％、1.0％、2.0％和4.0％的EDAC处理L929小鼠成纤维细胞,于6、12和24 h加细胞计数试剂盒(CCK-8)培养4h,用酶标仪观察吸光度值,计算细胞相对生长率;用EDAC交联Ⅱ型胶原蛋白复合软骨微粒修复猪膝关节缺损的软骨,对照组未用EDAC交联Ⅱ型胶原蛋白修复猪膝关节软骨缺损,1个月后取标本,进行大体和组织切片观察关节内软骨情况.结果 观察到1.0％和2.0％的EDAC在4h对皮肤有中度的刺激反应;2.0％的EDAC腹腔注射的小鼠出现重度毒性反应和死亡;不同浓度EDAC对L929细胞的生长均有一定抑制作用,且随着EDAC浓度的增加,其对细胞的抑制作用越强.EDAC交联Ⅱ型胶原蛋白组关节内软骨见不同程度的剥脱、软化,而对照组未见软骨破坏.结论 皮肤刺激实验、急性全身毒性实验和细胞毒性实验均证明EDAC对活体组织和细胞具有毒性作用,原位成胶接种细胞或植入体内,可能需要考虑更换无毒的交联剂.
目的 對碳化二亞胺(EDAC)的生物安全性,探討其作為交聯劑是否有毒.方法 取3隻健康的大白兔,皮內註射濃度為1％和2％的EDAC生理鹽水溶液200μl,于2、4、24、48 h和1週觀察皮膚有無水腫、紅斑,計算原髮刺激指數,判斷皮膚刺激反應類型;取20隻健康的昆明小鼠,按照10μl/g腹腔註射2％的EDAC,于4、8、12、24和48 h觀察小鼠有無輕、中、重度毒性反應和死亡;用濃度為0.4％、1.0％、2.0％和4.0％的EDAC處理L929小鼠成纖維細胞,于6、12和24 h加細胞計數試劑盒(CCK-8)培養4h,用酶標儀觀察吸光度值,計算細胞相對生長率;用EDAC交聯Ⅱ型膠原蛋白複閤軟骨微粒脩複豬膝關節缺損的軟骨,對照組未用EDAC交聯Ⅱ型膠原蛋白脩複豬膝關節軟骨缺損,1箇月後取標本,進行大體和組織切片觀察關節內軟骨情況.結果 觀察到1.0％和2.0％的EDAC在4h對皮膚有中度的刺激反應;2.0％的EDAC腹腔註射的小鼠齣現重度毒性反應和死亡;不同濃度EDAC對L929細胞的生長均有一定抑製作用,且隨著EDAC濃度的增加,其對細胞的抑製作用越彊.EDAC交聯Ⅱ型膠原蛋白組關節內軟骨見不同程度的剝脫、軟化,而對照組未見軟骨破壞.結論 皮膚刺激實驗、急性全身毒性實驗和細胞毒性實驗均證明EDAC對活體組織和細胞具有毒性作用,原位成膠接種細胞或植入體內,可能需要攷慮更換無毒的交聯劑.
목적 대탄화이아알(EDAC)적생물안전성,탐토기작위교련제시부유독.방법 취3지건강적대백토,피내주사농도위1％화2％적EDAC생리염수용액200μl,우2、4、24、48 h화1주관찰피부유무수종、홍반,계산원발자격지수,판단피부자격반응류형;취20지건강적곤명소서,안조10μl/g복강주사2％적EDAC,우4、8、12、24화48 h관찰소서유무경、중、중도독성반응화사망;용농도위0.4％、1.0％、2.0％화4.0％적EDAC처리L929소서성섬유세포,우6、12화24 h가세포계수시제합(CCK-8)배양4h,용매표의관찰흡광도치,계산세포상대생장솔;용EDAC교련Ⅱ형효원단백복합연골미립수복저슬관절결손적연골,대조조미용EDAC교련Ⅱ형효원단백수복저슬관절연골결손,1개월후취표본,진행대체화조직절편관찰관절내연골정황.결과 관찰도1.0％화2.0％적EDAC재4h대피부유중도적자격반응;2.0％적EDAC복강주사적소서출현중도독성반응화사망;불동농도EDAC대L929세포적생장균유일정억제작용,차수착EDAC농도적증가,기대세포적억제작용월강.EDAC교련Ⅱ형효원단백조관절내연골견불동정도적박탈、연화,이대조조미견연골파배.결론 피부자격실험、급성전신독성실험화세포독성실험균증명EDAC대활체조직화세포구유독성작용,원위성효접충세포혹식입체내,가능수요고필경환무독적교련제.
Objective To evaluate the biosecurity of 1-ethyl-3-3-dimethyl-aminopropyl carbodiimide (EDAC) acrosslinking agendemonstrate whetheEDAare poisonouand provide theoretical basifothe biosecurity foEDAcrosslink collagen.MethodThree New Zealand white rabbitwere injected 1％, 2％ EDA200 μl intradermally to observe the occurrence of swelling and erythemin 2 hours, 4 hours, 24 hours, 48 hourand 1 week, then calculated the primary irritanindex (PII) and evaluated the type of skin response to the EDAC.L929 mouse fibroblascellwere treated with 0.4％, 1.0％, 2.0％, 4.0％ EDAand cultured fo6 hours, 12 hours, 24 hours, then added cell counting kit-8 (CCK-8) and cultured fo4 hourto observe optical density by using microplate readeand calculate the relative growth rate of cells.With EDAcrosslinked type Ⅱ collagen and composited particleof cartilage to repaicartilage defect, and the control groupused type Ⅱ collagen composited particle of cartilage.Taken specimenafteone mouth, general tissue and histological section of cartilage were observed.Result1.0％ and 2.0％ EDAhave moderate toxicity to skin in 4 hours.Differenconcentrationof EDAcan inhibigrowth of L929 cells, and with the increase of concentration of EDAC, inhibition growth of cellwill be stronger.EDAcrosslinking type Ⅱ collagen groupwaseen differendegreeof softening and stripping, While the control group did nosee cartilage damage.Conclusion Skin irritation test, acute systemitoxicity tesand cell toxicity tesdemonstrated EDAitoxion living organ and cell.
