西南农业学报
西南農業學報
서남농업학보
Southwest China Journal of Agricultural Sciences
2015年
4期
1419-1422
,共4页
崔彦芹%李尚伟%张丽萍%杜娟%李云峰%查仁明
崔彥芹%李尚偉%張麗萍%杜娟%李雲峰%查仁明
최언근%리상위%장려평%두연%리운봉%사인명
半夏凝集素基因%水稻%表达载体构建%转基因植株
半夏凝集素基因%水稻%錶達載體構建%轉基因植株
반하응집소기인%수도%표체재체구건%전기인식주
Pinellia ternate agglutinin (pta)%Oryza sativa L.%Construction of expression vector%Transgenic plants
为了获得转基因抗虫水稻,将半夏凝集素基因pta导入水稻,并进行鉴定和筛选.在抗虫基因pta的5'端加2×35S启动子,两端分别添加HindⅢ和SpeⅠ酶切位点,并进行人工合成.将pta与植物表达载体p1301连接,经双酶切和测序鉴定.结果表明:重组表达载体p1301-pta构建成功;载体p1301-pta转化农杆菌LBA4404后用浸染法将pta基因导入水稻恢复系辐恢838中,对转化再生植株进行GUS染色以及GUS和pta基因的PCR鉴定后,共得到16株转基因阳性植株.
為瞭穫得轉基因抗蟲水稻,將半夏凝集素基因pta導入水稻,併進行鑒定和篩選.在抗蟲基因pta的5'耑加2×35S啟動子,兩耑分彆添加HindⅢ和SpeⅠ酶切位點,併進行人工閤成.將pta與植物錶達載體p1301連接,經雙酶切和測序鑒定.結果錶明:重組錶達載體p1301-pta構建成功;載體p1301-pta轉化農桿菌LBA4404後用浸染法將pta基因導入水稻恢複繫輻恢838中,對轉化再生植株進行GUS染色以及GUS和pta基因的PCR鑒定後,共得到16株轉基因暘性植株.
위료획득전기인항충수도,장반하응집소기인pta도입수도,병진행감정화사선.재항충기인pta적5'단가2×35S계동자,량단분별첨가HindⅢ화SpeⅠ매절위점,병진행인공합성.장pta여식물표체재체p1301련접,경쌍매절화측서감정.결과표명:중조표체재체p1301-pta구건성공;재체p1301-pta전화농간균LBA4404후용침염법장pta기인도입수도회복계복회838중,대전화재생식주진행GUS염색이급GUS화pta기인적PCR감정후,공득도16주전기인양성식주.
