广东医学
廣東醫學
엄동의학
Guangdong Medical Journal
2015年
18期
2773-2776
,共4页
哈丽娜%赵丽%张辉%杨安宁%姜怡邓
哈麗娜%趙麗%張輝%楊安寧%薑怡鄧
합려나%조려%장휘%양안저%강이산
巨噬细胞%枸杞多糖%氧化低密度脂蛋白%脂肪酸结合蛋白4%内质网应激
巨噬細胞%枸杞多糖%氧化低密度脂蛋白%脂肪痠結閤蛋白4%內質網應激
거서세포%구기다당%양화저밀도지단백%지방산결합단백4%내질망응격
macrophages%lycium barbarrum polysaccharide%oxygenized low density lipoprotein%fatty acid-binding protein 4%endoplasmic reticulum stress
目的 探讨枸杞多糖( LBP)对同型半胱氨酸( Hcy)致THP-1单核细胞源性巨噬细胞脂质沉积及内质网应激( ERS)的影响. 方法 复制THP-1单核细胞源性巨噬细胞模型,共分为以下6组:NC组不做其他处理,Hcy组选用100μmol/L的Hcy干预,20 LBP组选用终浓度100μmol/L的Hcy+20μg/mL的LBP干预,50 LBP组选用终浓度100μmol/L的Hcy+50μg/mL的LBP干预,100 LBP组选用终浓度100μmol/L的Hcy+100μg/mL的LBP干预,200 LBP组选用终浓度100μmol/L的Hcy+200μg/mL的LBP干预. 显微镜下观察巨噬细胞模型是否复制成功;RT-qPCR分析脂肪酸结合蛋白4 ( FABP4 ) mRNA表达改变;免疫荧光检测巨噬细胞内FABP4蛋白含量的变化;ELISA检测细胞内氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)及内质网应激标志蛋白(CHOP、GRP78、XBP-1)含量的变化. 结果 成功复制THP-1单核细胞源性巨噬细胞模型. 与NC组比较,Hcy组巨噬细胞内ox-LDL及FABP4的含量及内质网应激标志蛋白表达显著增加(P<0.05,P<0.01). 而不同LBP作用浓度组间比较,ox-LDL含量和FABP4 mRNA水平,50LBP组、100LBP组、200LBP组与Hcy组比较,差异有统计学意义( P<0.05,P<0.01),100LBP组、200LBP组与50LBP组比较差异有统计学意义(P<0.05). 200 LBP组与Hcy组、50 LBP组比较,GRP78含量差异统计学意义( P<0.05,P<0.01). 100 LBP组、200 LBP组与Hcy组比较,CHOP含量差异有统计学意义(P<0.01),200 LBP组与50 LBP组比较,CHOP含量差异有统计学意义(P<0.05). 50 LBP组、100 LBP组、200 LBP组与Hcy组比较,Xbp-1含量差异有统计学意义( P<0.01 ) ,100 LBP组、200 LBP组与50 LBP组比较,Xbp-1含量差异有统计学意义(P<0.01). 结论 随着LBP浓度的增加,可逐渐减少Hcy导致的THP-1单核细胞源性巨噬细胞内的脂质沉积及内质网应激蛋白含量,从而发挥抗动脉粥样硬化的作用.
目的 探討枸杞多糖( LBP)對同型半胱氨痠( Hcy)緻THP-1單覈細胞源性巨噬細胞脂質沉積及內質網應激( ERS)的影響. 方法 複製THP-1單覈細胞源性巨噬細胞模型,共分為以下6組:NC組不做其他處理,Hcy組選用100μmol/L的Hcy榦預,20 LBP組選用終濃度100μmol/L的Hcy+20μg/mL的LBP榦預,50 LBP組選用終濃度100μmol/L的Hcy+50μg/mL的LBP榦預,100 LBP組選用終濃度100μmol/L的Hcy+100μg/mL的LBP榦預,200 LBP組選用終濃度100μmol/L的Hcy+200μg/mL的LBP榦預. 顯微鏡下觀察巨噬細胞模型是否複製成功;RT-qPCR分析脂肪痠結閤蛋白4 ( FABP4 ) mRNA錶達改變;免疫熒光檢測巨噬細胞內FABP4蛋白含量的變化;ELISA檢測細胞內氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)及內質網應激標誌蛋白(CHOP、GRP78、XBP-1)含量的變化. 結果 成功複製THP-1單覈細胞源性巨噬細胞模型. 與NC組比較,Hcy組巨噬細胞內ox-LDL及FABP4的含量及內質網應激標誌蛋白錶達顯著增加(P<0.05,P<0.01). 而不同LBP作用濃度組間比較,ox-LDL含量和FABP4 mRNA水平,50LBP組、100LBP組、200LBP組與Hcy組比較,差異有統計學意義( P<0.05,P<0.01),100LBP組、200LBP組與50LBP組比較差異有統計學意義(P<0.05). 200 LBP組與Hcy組、50 LBP組比較,GRP78含量差異統計學意義( P<0.05,P<0.01). 100 LBP組、200 LBP組與Hcy組比較,CHOP含量差異有統計學意義(P<0.01),200 LBP組與50 LBP組比較,CHOP含量差異有統計學意義(P<0.05). 50 LBP組、100 LBP組、200 LBP組與Hcy組比較,Xbp-1含量差異有統計學意義( P<0.01 ) ,100 LBP組、200 LBP組與50 LBP組比較,Xbp-1含量差異有統計學意義(P<0.01). 結論 隨著LBP濃度的增加,可逐漸減少Hcy導緻的THP-1單覈細胞源性巨噬細胞內的脂質沉積及內質網應激蛋白含量,從而髮揮抗動脈粥樣硬化的作用.
목적 탐토구기다당( LBP)대동형반광안산( Hcy)치THP-1단핵세포원성거서세포지질침적급내질망응격( ERS)적영향. 방법 복제THP-1단핵세포원성거서세포모형,공분위이하6조:NC조불주기타처리,Hcy조선용100μmol/L적Hcy간예,20 LBP조선용종농도100μmol/L적Hcy+20μg/mL적LBP간예,50 LBP조선용종농도100μmol/L적Hcy+50μg/mL적LBP간예,100 LBP조선용종농도100μmol/L적Hcy+100μg/mL적LBP간예,200 LBP조선용종농도100μmol/L적Hcy+200μg/mL적LBP간예. 현미경하관찰거서세포모형시부복제성공;RT-qPCR분석지방산결합단백4 ( FABP4 ) mRNA표체개변;면역형광검측거서세포내FABP4단백함량적변화;ELISA검측세포내양화저밀도지단백(ox-LDL)급내질망응격표지단백(CHOP、GRP78、XBP-1)함량적변화. 결과 성공복제THP-1단핵세포원성거서세포모형. 여NC조비교,Hcy조거서세포내ox-LDL급FABP4적함량급내질망응격표지단백표체현저증가(P<0.05,P<0.01). 이불동LBP작용농도조간비교,ox-LDL함량화FABP4 mRNA수평,50LBP조、100LBP조、200LBP조여Hcy조비교,차이유통계학의의( P<0.05,P<0.01),100LBP조、200LBP조여50LBP조비교차이유통계학의의(P<0.05). 200 LBP조여Hcy조、50 LBP조비교,GRP78함량차이통계학의의( P<0.05,P<0.01). 100 LBP조、200 LBP조여Hcy조비교,CHOP함량차이유통계학의의(P<0.01),200 LBP조여50 LBP조비교,CHOP함량차이유통계학의의(P<0.05). 50 LBP조、100 LBP조、200 LBP조여Hcy조비교,Xbp-1함량차이유통계학의의( P<0.01 ) ,100 LBP조、200 LBP조여50 LBP조비교,Xbp-1함량차이유통계학의의(P<0.01). 결론 수착LBP농도적증가,가축점감소Hcy도치적THP-1단핵세포원성거서세포내적지질침적급내질망응격단백함량,종이발휘항동맥죽양경화적작용.
Objective To investigate the effect of lycium barbarum polysaccharide ( LBP ) on homocysteine ( Hcy) -induced lipid accumulation and endoplasmic reticulum stress in THP -1 monocyte -derived macrophages. Methods The model of THP-1 monocyte-derived macrophages was replicated.Cultured cells were divided into 6 groups:the control group (NC), the 100 μmol/L Hcy group (Hcy), the 100 μmol/L Hcy+20, 50,100, 200 μg/mL LBP groups.The macrophage model was verified under microscope.Fatty acid-binding protein 4 ( FABP4) mRNA levels were detected by real-time PCR.FABP4 protein levels in macrophages were analyzed by immunofluorescence.Intracellu-lar oxygenized low density lipoprotein (ox-LDL) and endoplasmic reticulum stress markers (CHOP, GRP78, XBP-1) levels were measured by ELISA kits.Results The macrophage model was successfully established.Treatments of 100μmol/L Hcy and LBP at various concentrations showed that levels of ox-LDL, FABP4 and endoplasmic reticulum stress markers were higher in the Hcy group than in the NC group.While different levels of LBP diminished the alterations in an apparent dose-dependent manner.Conclusion At increasing concentrations, LBP attenuates homocysteine-induced lipid accumulation and down-regulates the levels of endoplasmic reticulum stress markers, thus playing a role of anti-atherosclerosis.
