热带生物学报
熱帶生物學報
열대생물학보
Journal of Tropical Biology
2015年
3期
256-260
,共5页
洪灏%刘小婷%肖华%黄惜%袁红梅
洪灝%劉小婷%肖華%黃惜%袁紅梅
홍호%류소정%초화%황석%원홍매
HbCoil%pHIS载体%自转录激活%酵母单杂
HbCoil%pHIS載體%自轉錄激活%酵母單雜
HbCoil%pHIS재체%자전록격활%효모단잡
HbCoi1%pHIS vector%auto-activation%yeast-one-hybrid
茉莉酸是调节天然橡胶树产胶的主要激素,HbCoil是茉莉酸信号的受体,研究HbCoil基因的表达调控对了解橡胶树的产胶机理具有重要的意义.首先PCR扩增HbCoil基因的启动子,然后将目标序列插入pHis2.1载体,构建酵母单杂诱饵载体.将该载体转入酵母Y187菌株感受态中,在缺失培养基上检测自转录激活,发现HbCoil基因的启动子在3-AT浓度为10 mmol·L-1时自转录激活得到有效抑制.在此基础上,通过与橡胶eDNA文库进行酵母单杂筛选,得到了几个可能与Hbcoil启动子发生互作的基因,其中包括DNA结合蛋白、核糖体蛋白和功能未知基因,旨在为深入研究Hbcoil基因表达调控打下基础.
茉莉痠是調節天然橡膠樹產膠的主要激素,HbCoil是茉莉痠信號的受體,研究HbCoil基因的錶達調控對瞭解橡膠樹的產膠機理具有重要的意義.首先PCR擴增HbCoil基因的啟動子,然後將目標序列插入pHis2.1載體,構建酵母單雜誘餌載體.將該載體轉入酵母Y187菌株感受態中,在缺失培養基上檢測自轉錄激活,髮現HbCoil基因的啟動子在3-AT濃度為10 mmol·L-1時自轉錄激活得到有效抑製.在此基礎上,通過與橡膠eDNA文庫進行酵母單雜篩選,得到瞭幾箇可能與Hbcoil啟動子髮生互作的基因,其中包括DNA結閤蛋白、覈糖體蛋白和功能未知基因,旨在為深入研究Hbcoil基因錶達調控打下基礎.
말리산시조절천연상효수산효적주요격소,HbCoil시말리산신호적수체,연구HbCoil기인적표체조공대료해상효수적산효궤리구유중요적의의.수선PCR확증HbCoil기인적계동자,연후장목표서렬삽입pHis2.1재체,구건효모단잡유이재체.장해재체전입효모Y187균주감수태중,재결실배양기상검측자전록격활,발현HbCoil기인적계동자재3-AT농도위10 mmol·L-1시자전록격활득도유효억제.재차기출상,통과여상효eDNA문고진행효모단잡사선,득도료궤개가능여Hbcoil계동자발생호작적기인,기중포괄DNA결합단백、핵당체단백화공능미지기인,지재위심입연구Hbcoil기인표체조공타하기출.
