西北植物学报
西北植物學報
서북식물학보
Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica
2015年
9期
1709-1721
,共13页
陈芳兰%林玉玲%陈裕坤%冯新%张梓浩%赖钟雄
陳芳蘭%林玉玲%陳裕坤%馮新%張梓浩%賴鐘雄
진방란%림옥령%진유곤%풍신%장재호%뢰종웅
三明野生蕉%β-1,3葡聚糖酶%水杨酸%低温胁迫%亚细胞定位%实时荧光定量PCR
三明野生蕉%β-1,3葡聚糖酶%水楊痠%低溫脅迫%亞細胞定位%實時熒光定量PCR
삼명야생초%β-1,3포취당매%수양산%저온협박%아세포정위%실시형광정량PCR
Sanming wild banana%β-1,3-glucanase%salicylic acid%cold stress%subcellular localization%qRT-PCR
以三明野生蕉(Musa spp.AB group)为材料,利用RT-PCR和RACE技术,克隆获得β 1,3葡聚糖酶5个基因(Mugsp1.2～Mugsp5)的cDNA和DNA序列.序列和生物信息学分析表明Mugsp1.2、Mugsp2、Mugsp3、Mugsp4和Mugsp5的ORF长度分别为1 020、1 047、999、1 023和960 bp,分别编码339、348、332、340和319个氨基酸;Mugsp1.2、Mugsp2和Mugsp4蛋白具有N端和C端(CTPP)信号肽结构,推测为Ⅰ类β-1,3葡聚糖酶,而Mugsp3只含有N端信号肽,无CTPP结构,Mugsp5则不具有信号肽结构;构建Mugsp1.2、Mugsp2、Mugsp4瞬时表达载体并转化洋葱表皮的亚细胞定位观察结果显示,常温下Mugsp1.2、Mugsp2和Mugsp4主要在细胞膜、细胞质上表达,而经过8℃低温处理后Mugsp1.2、Mugsp2和Mugsp4均能够转移至细胞核表达;β-1,3葡聚糖酶基因在不同低温处理下的实时荧光定量(qRT PCR)检测结果显示,β 1,3葡聚糖酶基因均能响应低温胁迫,是低温胁迫相关基因,但基因间表达水平存在差异;低温下SA处理后的定量结果显示,SA处理会推迟β-1,3葡聚糖酶基因的表达.
以三明野生蕉(Musa spp.AB group)為材料,利用RT-PCR和RACE技術,剋隆穫得β 1,3葡聚糖酶5箇基因(Mugsp1.2～Mugsp5)的cDNA和DNA序列.序列和生物信息學分析錶明Mugsp1.2、Mugsp2、Mugsp3、Mugsp4和Mugsp5的ORF長度分彆為1 020、1 047、999、1 023和960 bp,分彆編碼339、348、332、340和319箇氨基痠;Mugsp1.2、Mugsp2和Mugsp4蛋白具有N耑和C耑(CTPP)信號肽結構,推測為Ⅰ類β-1,3葡聚糖酶,而Mugsp3隻含有N耑信號肽,無CTPP結構,Mugsp5則不具有信號肽結構;構建Mugsp1.2、Mugsp2、Mugsp4瞬時錶達載體併轉化洋蔥錶皮的亞細胞定位觀察結果顯示,常溫下Mugsp1.2、Mugsp2和Mugsp4主要在細胞膜、細胞質上錶達,而經過8℃低溫處理後Mugsp1.2、Mugsp2和Mugsp4均能夠轉移至細胞覈錶達;β-1,3葡聚糖酶基因在不同低溫處理下的實時熒光定量(qRT PCR)檢測結果顯示,β 1,3葡聚糖酶基因均能響應低溫脅迫,是低溫脅迫相關基因,但基因間錶達水平存在差異;低溫下SA處理後的定量結果顯示,SA處理會推遲β-1,3葡聚糖酶基因的錶達.
이삼명야생초(Musa spp.AB group)위재료,이용RT-PCR화RACE기술,극륭획득β 1,3포취당매5개기인(Mugsp1.2～Mugsp5)적cDNA화DNA서렬.서렬화생물신식학분석표명Mugsp1.2、Mugsp2、Mugsp3、Mugsp4화Mugsp5적ORF장도분별위1 020、1 047、999、1 023화960 bp,분별편마339、348、332、340화319개안기산;Mugsp1.2、Mugsp2화Mugsp4단백구유N단화C단(CTPP)신호태결구,추측위Ⅰ류β-1,3포취당매,이Mugsp3지함유N단신호태,무CTPP결구,Mugsp5칙불구유신호태결구;구건Mugsp1.2、Mugsp2、Mugsp4순시표체재체병전화양총표피적아세포정위관찰결과현시,상온하Mugsp1.2、Mugsp2화Mugsp4주요재세포막、세포질상표체,이경과8℃저온처리후Mugsp1.2、Mugsp2화Mugsp4균능구전이지세포핵표체;β-1,3포취당매기인재불동저온처리하적실시형광정량(qRT PCR)검측결과현시,β 1,3포취당매기인균능향응저온협박,시저온협박상관기인,단기인간표체수평존재차이;저온하SA처리후적정량결과현시,SA처리회추지β-1,3포취당매기인적표체.
