西北植物学报
西北植物學報
서북식물학보
Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica
2015年
9期
1899-1905
,共7页
‘银中杨’%原生质体%分离%纯化
‘銀中楊’%原生質體%分離%純化
‘은중양’%원생질체%분리%순화
Populus alba×P.berolinensis Yinzhong%protoplast%isolation%purification
以三倍体杨树品种‘银中杨’(Populus alba×P.berolinensis Yinzhong)无菌苗叶片为材料,对其原生质体分离及纯化条件进行研究,为进一步通过细胞融合、基因工程等进行品种改良探索新的途径.结果表明:酶的种类及浓度、渗透压、酶解时间对‘银中杨’叶肉原生质体分离效果有显著影响,适宜的分离条件为CPW+3％Cellulase RS+0.5％ Macerozyme R-10+0.3％ Pectinse Y-23+ 0.6 mol/L甘露醇+0.6 g/L MES+1 g/L BAS,酶解时间为8h,原生质体产量和活力分别为2.13×10 7个/g和80.18％;‘银中杨’叶肉原生质体纯化最佳方法为上浮法蔗糖等密度离心,且蔗糖浓度为40％时原生质体产量最高(1.06×10 7个/g),可满足进一步的原生质体培养等技术的要求.
以三倍體楊樹品種‘銀中楊’(Populus alba×P.berolinensis Yinzhong)無菌苗葉片為材料,對其原生質體分離及純化條件進行研究,為進一步通過細胞融閤、基因工程等進行品種改良探索新的途徑.結果錶明:酶的種類及濃度、滲透壓、酶解時間對‘銀中楊’葉肉原生質體分離效果有顯著影響,適宜的分離條件為CPW+3％Cellulase RS+0.5％ Macerozyme R-10+0.3％ Pectinse Y-23+ 0.6 mol/L甘露醇+0.6 g/L MES+1 g/L BAS,酶解時間為8h,原生質體產量和活力分彆為2.13×10 7箇/g和80.18％;‘銀中楊’葉肉原生質體純化最佳方法為上浮法蔗糖等密度離心,且蔗糖濃度為40％時原生質體產量最高(1.06×10 7箇/g),可滿足進一步的原生質體培養等技術的要求.
이삼배체양수품충‘은중양’(Populus alba×P.berolinensis Yinzhong)무균묘협편위재료,대기원생질체분리급순화조건진행연구,위진일보통과세포융합、기인공정등진행품충개량탐색신적도경.결과표명:매적충류급농도、삼투압、매해시간대‘은중양’협육원생질체분리효과유현저영향,괄의적분리조건위CPW+3％Cellulase RS+0.5％ Macerozyme R-10+0.3％ Pectinse Y-23+ 0.6 mol/L감로순+0.6 g/L MES+1 g/L BAS,매해시간위8h,원생질체산량화활력분별위2.13×10 7개/g화80.18％;‘은중양’협육원생질체순화최가방법위상부법자당등밀도리심,차자당농도위40％시원생질체산량최고(1.06×10 7개/g),가만족진일보적원생질체배양등기술적요구.
