中华肝脏病杂志
中華肝髒病雜誌
중화간장병잡지
Chinese Journal of Hepatology
2015年
10期
771-774
,共4页
黄海燕%安佰全%辛永宁%姜曼%金文文%林中华%姜相君%宣世英
黃海燕%安佰全%辛永寧%薑曼%金文文%林中華%薑相君%宣世英
황해연%안백전%신영저%강만%금문문%림중화%강상군%선세영
脂肪肝%甘油三酯类%固醇调节元件结合蛋白-1c%PNPLA3
脂肪肝%甘油三酯類%固醇調節元件結閤蛋白-1c%PNPLA3
지방간%감유삼지류%고순조절원건결합단백-1c%PNPLA3
Fatty liver%Triglycerides%Sterol regulatory element-binding protein-1c%PNPLA3
目的 探讨PNPLA3基因I148M过表达的Huh7细胞中固醇调节元件结合蛋白(SREBP)-1c与甘油三酯的关系. 方法 用空病毒和携带PNPLA3基因I148M突变型的慢病毒感染Huh-7细胞,构建空病毒组(对照组)和PNPLA3基因I148M突变型组(突变组).分别用油红O染色显示细胞内甘油三酯含量变化,用全自动生物化学分析仪测定各组细胞中甘油三酯及总胆固醇含量,荧光定量PCR测定SREBP-1c mRNA的水平变化.Western blot检测SREBP-1c蛋白的表达情况.两组均数的比较采用t检验,指标间的关系判定用直线相关分析. 结果 油红O染色显示突变组中甘油三酯含量增加.突变组的甘油三酯和总胆固醇含量明显升高,分别为(0.54±0.03)mmol/L和(0.28±0.03) mmol/L,高于对照组的(0.23±0.02) mmol/L和(0.13±0.02) mmol/L(t值分别为22.58和11.83,P值均＜0.01).SREBP-1c mRNA表达量增加,与对照组相比的差异具有统计学意义(P＜ 0.01).SREBP-1c蛋白也较对照组有所增加.突变组SREBP-1c水平与甘油三酯水平呈正相关(r=0.912,P＜0.01).结论 PNPLA3基因I148M多态性可促进脂肪合成增加,其中甘油三酯的合成增加可能通过SREBP-1c起作用,这为探讨非酒精性脂肪性肝病的发病机制提供了新线索.
目的 探討PNPLA3基因I148M過錶達的Huh7細胞中固醇調節元件結閤蛋白(SREBP)-1c與甘油三酯的關繫. 方法 用空病毒和攜帶PNPLA3基因I148M突變型的慢病毒感染Huh-7細胞,構建空病毒組(對照組)和PNPLA3基因I148M突變型組(突變組).分彆用油紅O染色顯示細胞內甘油三酯含量變化,用全自動生物化學分析儀測定各組細胞中甘油三酯及總膽固醇含量,熒光定量PCR測定SREBP-1c mRNA的水平變化.Western blot檢測SREBP-1c蛋白的錶達情況.兩組均數的比較採用t檢驗,指標間的關繫判定用直線相關分析. 結果 油紅O染色顯示突變組中甘油三酯含量增加.突變組的甘油三酯和總膽固醇含量明顯升高,分彆為(0.54±0.03)mmol/L和(0.28±0.03) mmol/L,高于對照組的(0.23±0.02) mmol/L和(0.13±0.02) mmol/L(t值分彆為22.58和11.83,P值均＜0.01).SREBP-1c mRNA錶達量增加,與對照組相比的差異具有統計學意義(P＜ 0.01).SREBP-1c蛋白也較對照組有所增加.突變組SREBP-1c水平與甘油三酯水平呈正相關(r=0.912,P＜0.01).結論 PNPLA3基因I148M多態性可促進脂肪閤成增加,其中甘油三酯的閤成增加可能通過SREBP-1c起作用,這為探討非酒精性脂肪性肝病的髮病機製提供瞭新線索.
목적 탐토PNPLA3기인I148M과표체적Huh7세포중고순조절원건결합단백(SREBP)-1c여감유삼지적관계. 방법 용공병독화휴대PNPLA3기인I148M돌변형적만병독감염Huh-7세포,구건공병독조(대조조)화PNPLA3기인I148M돌변형조(돌변조).분별용유홍O염색현시세포내감유삼지함량변화,용전자동생물화학분석의측정각조세포중감유삼지급총담고순함량,형광정량PCR측정SREBP-1c mRNA적수평변화.Western blot검측SREBP-1c단백적표체정황.량조균수적비교채용t검험,지표간적관계판정용직선상관분석. 결과 유홍O염색현시돌변조중감유삼지함량증가.돌변조적감유삼지화총담고순함량명현승고,분별위(0.54±0.03)mmol/L화(0.28±0.03) mmol/L,고우대조조적(0.23±0.02) mmol/L화(0.13±0.02) mmol/L(t치분별위22.58화11.83,P치균＜0.01).SREBP-1c mRNA표체량증가,여대조조상비적차이구유통계학의의(P＜ 0.01).SREBP-1c단백야교대조조유소증가.돌변조SREBP-1c수평여감유삼지수평정정상관(r=0.912,P＜0.01).결론 PNPLA3기인I148M다태성가촉진지방합성증가,기중감유삼지적합성증가가능통과SREBP-1c기작용,저위탐토비주정성지방성간병적발병궤제제공료신선색.
Objective To investigate the relationship between SREBP-1c and the risk of liver disease associated with the triacylglyceride lipase PNPLA3 I148M variant using a human hepatoma cell line model transfected with recombinant lentiviruses.Methods Huh7 cells were transfected with control lentivirus or lentivirus containing the PNPLA3 I148M variant (variant).The two cell groups were compared to assess differences in triglyceride content (using oil red O staining), levels of triglyceride and cholesterol (using automated biochemical analyzer), expression of SREBP-lc mRNA (using fluorescence quantitative PCR), and expression of SREBP-1c protein (using western blot.Results Cells expressing the PNPLA3 I148M variant showed higher triglyceride content (0.54 ± 0.03 mmol/L vs.control cells: 0.23±0.02 mmol/L;t =22.58,P ＜ 0.001),cholesterol level (0.28 ± 0.03 mmol/L vs.control cells: 0.13±0.02 mmol/L;t =11.83, P ＜ 0.001), SREBP-1cmRNA expression (13.59 ± 0.60 vs.11.81 ± 0.82;[The abstract and text in the paper say variant increases, but the data shown says the higher value is in the control cells.Please correct to properly express the data.] P =0.001), and SREBP-1c protein expression.The level of SREBP-1c was positively correlated with serum triglyceride in the cells expressing the PNPLA3 I148M variant (r =0.912, P ＜ 0.01).Conclusion The risk of liver disease associated with the PNPLA3 I148M variant, which increases lipogenesis, may involve SREBP-1c and a pathway that increases triglycerides.
