中山大学学报（医学科学版）
中山大學學報（醫學科學版）
중산대학학보（의학과학판）
Journal of Sun Yat-sen University(Medical Sciences)
2015年
5期
676-682
,共7页
李付贵%陈京%程伟民%季明芳
李付貴%陳京%程偉民%季明芳
리부귀%진경%정위민%계명방
脂肪干细胞%AKT%成脂肪分化%shRNA
脂肪榦細胞%AKT%成脂肪分化%shRNA
지방간세포%AKT%성지방분화%shRNA
adipose stem cells%AKT%adipogenesis%shRNA
[目的]探讨AKT不同亚型AKT1和AKT2在成人脂肪干细胞成脂分化过程的表达及意义.[方法]取生长状态良好的P3代的成人脂肪组织来源的间充质干细胞(hADSC),以负载AKT1-shRNA和AKT2-SHRNA的慢病毒载体分别转染hADSC,获得稳定干扰AKT1和AKT2的细胞株(分别设为AKT1-3组和AKT2-1组),转染非干扰序列NTC-shRNA的设为对照组.将上述细胞分别进行成脂肪诱导,观察脂滴的形成,并检测相关成脂肪基因的表达和成脂肪关键转录因子PPARγ的表达.[结果]首先成功获得稳定表达AKT1-shRNA和AKT2-shRNA的hADSC.与对照组细胞的成脂过程相比,AKT1-3组hADSC成脂分化并无明显影响;而AKT2-1组脂滴形成明显减少,油红O染色与定量也显示相应改变(P＜0.01).成脂旨相关基因定量结果也发现,FABP4、LPL及GPDH等表达明显下降(P＜0.01).此外,AKT1-3组诱导后下游转录因子PPARγ的表达与NTC组相比,未见明显改变;而AKT2-1组的PPARγ表达明显下降,尤其是PPARγ2的降低更为明显. [结论]AKT2干扰导致hADSC成脂肪过程严重抑制,而AKT1干扰则并不能影响该过程.
[目的]探討AKT不同亞型AKT1和AKT2在成人脂肪榦細胞成脂分化過程的錶達及意義.[方法]取生長狀態良好的P3代的成人脂肪組織來源的間充質榦細胞(hADSC),以負載AKT1-shRNA和AKT2-SHRNA的慢病毒載體分彆轉染hADSC,穫得穩定榦擾AKT1和AKT2的細胞株(分彆設為AKT1-3組和AKT2-1組),轉染非榦擾序列NTC-shRNA的設為對照組.將上述細胞分彆進行成脂肪誘導,觀察脂滴的形成,併檢測相關成脂肪基因的錶達和成脂肪關鍵轉錄因子PPARγ的錶達.[結果]首先成功穫得穩定錶達AKT1-shRNA和AKT2-shRNA的hADSC.與對照組細胞的成脂過程相比,AKT1-3組hADSC成脂分化併無明顯影響;而AKT2-1組脂滴形成明顯減少,油紅O染色與定量也顯示相應改變(P＜0.01).成脂旨相關基因定量結果也髮現,FABP4、LPL及GPDH等錶達明顯下降(P＜0.01).此外,AKT1-3組誘導後下遊轉錄因子PPARγ的錶達與NTC組相比,未見明顯改變;而AKT2-1組的PPARγ錶達明顯下降,尤其是PPARγ2的降低更為明顯. [結論]AKT2榦擾導緻hADSC成脂肪過程嚴重抑製,而AKT1榦擾則併不能影響該過程.
[목적]탐토AKT불동아형AKT1화AKT2재성인지방간세포성지분화과정적표체급의의.[방법]취생장상태량호적P3대적성인지방조직래원적간충질간세포(hADSC),이부재AKT1-shRNA화AKT2-SHRNA적만병독재체분별전염hADSC,획득은정간우AKT1화AKT2적세포주(분별설위AKT1-3조화AKT2-1조),전염비간우서렬NTC-shRNA적설위대조조.장상술세포분별진행성지방유도,관찰지적적형성,병검측상관성지방기인적표체화성지방관건전록인자PPARγ적표체.[결과]수선성공획득은정표체AKT1-shRNA화AKT2-shRNA적hADSC.여대조조세포적성지과정상비,AKT1-3조hADSC성지분화병무명현영향;이AKT2-1조지적형성명현감소,유홍O염색여정량야현시상응개변(P＜0.01).성지지상관기인정량결과야발현,FABP4、LPL급GPDH등표체명현하강(P＜0.01).차외,AKT1-3조유도후하유전록인자PPARγ적표체여NTC조상비,미견명현개변;이AKT2-1조적PPARγ표체명현하강,우기시PPARγ2적강저경위명현. [결론]AKT2간우도치hADSC성지방과정엄중억제,이AKT1간우칙병불능영향해과정.
