中南大学学报（医学版）
中南大學學報（醫學版）
중남대학학보（의학판）
Journal of Central South University(Medical Science)
2015年
8期
837-842
,共6页
初令%王天生%胡永斌%蒋海鹰%谷永红%粟占三
初令%王天生%鬍永斌%蔣海鷹%穀永紅%粟佔三
초령%왕천생%호영빈%장해응%곡영홍%속점삼
矽肺%蛋白质组学%α晶状体球蛋白B%二维凝胶电泳%基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱
矽肺%蛋白質組學%α晶狀體毬蛋白B%二維凝膠電泳%基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜
석폐%단백질조학%α정상체구단백B%이유응효전영%기질보조격광해흡전리비행시간질보
silicosis%proteomics%alpha B-crystallin%2-dimensional gel electrophoresis%MALDI-TOF-MS
目的:建立二氧化硅诱导早期肺损伤大鼠肺组织的二维凝胶电泳图谱,筛选在此过程中起关键作用的靶蛋白分子并进行验证.方法:制作二氧化硅诱导大鼠早期肺损伤模型(实验组),通过HE染色观察肺部形态变化,用双向凝胶电泳法建立二维凝胶图谱,用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析鉴定差异表达蛋白分子,用Western印迹验证差异表达蛋白分子在肺组织中的表达.结果:成功制作二氧化硅早期肺损伤模型,建立实验组及对照组肺组织二维凝胶电泳图谱,二者蛋白表达及分布存在差异,发现差异点40个,选取重复性好,在凝胶上位置和口表达适中的共20个进行MALDI-TOF-MS鉴定及数据库搜索并筛选,鉴定出差异蛋白13种,包括α晶状体球蛋白B、间隙蛋白Ⅰ、肥大细胞蛋白酶等,进一步用Western印迹证实实验组α晶状体球蛋白B表达明显增加,与蛋白质组学结果一致.结论:α晶状体球蛋白B在早期矽肺组织中表达明显升高,提示其可能在矽肺的发生发展中起关键作用.
目的:建立二氧化硅誘導早期肺損傷大鼠肺組織的二維凝膠電泳圖譜,篩選在此過程中起關鍵作用的靶蛋白分子併進行驗證.方法:製作二氧化硅誘導大鼠早期肺損傷模型(實驗組),通過HE染色觀察肺部形態變化,用雙嚮凝膠電泳法建立二維凝膠圖譜,用基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜(MALDI-TOF-MS)分析鑒定差異錶達蛋白分子,用Western印跡驗證差異錶達蛋白分子在肺組織中的錶達.結果:成功製作二氧化硅早期肺損傷模型,建立實驗組及對照組肺組織二維凝膠電泳圖譜,二者蛋白錶達及分佈存在差異,髮現差異點40箇,選取重複性好,在凝膠上位置和口錶達適中的共20箇進行MALDI-TOF-MS鑒定及數據庫搜索併篩選,鑒定齣差異蛋白13種,包括α晶狀體毬蛋白B、間隙蛋白Ⅰ、肥大細胞蛋白酶等,進一步用Western印跡證實實驗組α晶狀體毬蛋白B錶達明顯增加,與蛋白質組學結果一緻.結論:α晶狀體毬蛋白B在早期矽肺組織中錶達明顯升高,提示其可能在矽肺的髮生髮展中起關鍵作用.
목적:건립이양화규유도조기폐손상대서폐조직적이유응효전영도보,사선재차과정중기관건작용적파단백분자병진행험증.방법:제작이양화규유도대서조기폐손상모형(실험조),통과HE염색관찰폐부형태변화,용쌍향응효전영법건립이유응효도보,용기질보조격광해흡전리비행시간질보(MALDI-TOF-MS)분석감정차이표체단백분자,용Western인적험증차이표체단백분자재폐조직중적표체.결과:성공제작이양화규조기폐손상모형,건립실험조급대조조폐조직이유응효전영도보,이자단백표체급분포존재차이,발현차이점40개,선취중복성호,재응효상위치화구표체괄중적공20개진행MALDI-TOF-MS감정급수거고수색병사선,감정출차이단백13충,포괄α정상체구단백B、간극단백Ⅰ、비대세포단백매등,진일보용Western인적증실실험조α정상체구단백B표체명현증가,여단백질조학결과일치.결론:α정상체구단백B재조기석폐조직중표체명현승고,제시기가능재석폐적발생발전중기관건작용.
