哈尔滨医科大学学报
哈爾濱醫科大學學報
합이빈의과대학학보
Journal of Harbin Medical University
2015年
4期
283-287
,共5页
SiHa细胞%hTERT%RNA干扰%细胞凋亡%放射敏感性
SiHa細胞%hTERT%RNA榦擾%細胞凋亡%放射敏感性
SiHa세포%hTERT%RNA간우%세포조망%방사민감성
SiHa cells%hTERT%RNA interference%apoptosis%radiosensitivity
目的 研究转染前后对SiHa细胞增殖、凋亡及放射敏感性的影响.方法 SiHa细胞分为3组:实验组、阴性对照组及空白对照组,其中实验组和阴性对照组分别用siRNA#1 ～4和阴性对照siRNA转染,空白对照组不做任何转染处理.用实时荧光定量PCR和蛋白印迹法检测各组细胞hTERT mRNA和蛋白的表达,CCK-8法检测细胞的增殖情况,流式细胞仪检测各组细胞凋亡率,克隆形成实验通过单靶多击模型拟合计算D0、Dq值,检测细胞的放射敏感性.结果 转染后48 h及72 h,实验组siRNA#3hTERT mRNA及蛋白表达量较阴性对照组下降,P＜0.05;转染96 h后实验组细胞A值0.80±0.09,阴性对照组为1.25 ±0.11,P=0.0054;转染后实验组早期凋亡率(10.50 ±0.20)％较阴性对照组(5.80±0.10)％明显增加,P ＜0.0001;实验组及阴性对照组D0及Dq值分别为1.53 Gy、0.77 Gy和2.19 Gy、1.31 Gy,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 siRNA能特异性下调SiHa细胞中hTERT mRNA和蛋白水平的表达,提高细胞的早期凋亡率并抑制细胞增殖活性,增强SiHa细胞的放射敏感性.
目的 研究轉染前後對SiHa細胞增殖、凋亡及放射敏感性的影響.方法 SiHa細胞分為3組:實驗組、陰性對照組及空白對照組,其中實驗組和陰性對照組分彆用siRNA#1 ～4和陰性對照siRNA轉染,空白對照組不做任何轉染處理.用實時熒光定量PCR和蛋白印跡法檢測各組細胞hTERT mRNA和蛋白的錶達,CCK-8法檢測細胞的增殖情況,流式細胞儀檢測各組細胞凋亡率,剋隆形成實驗通過單靶多擊模型擬閤計算D0、Dq值,檢測細胞的放射敏感性.結果 轉染後48 h及72 h,實驗組siRNA#3hTERT mRNA及蛋白錶達量較陰性對照組下降,P＜0.05;轉染96 h後實驗組細胞A值0.80±0.09,陰性對照組為1.25 ±0.11,P=0.0054;轉染後實驗組早期凋亡率(10.50 ±0.20)％較陰性對照組(5.80±0.10)％明顯增加,P ＜0.0001;實驗組及陰性對照組D0及Dq值分彆為1.53 Gy、0.77 Gy和2.19 Gy、1.31 Gy,差異有統計學意義(P＜0.05).結論 siRNA能特異性下調SiHa細胞中hTERT mRNA和蛋白水平的錶達,提高細胞的早期凋亡率併抑製細胞增殖活性,增彊SiHa細胞的放射敏感性.
목적 연구전염전후대SiHa세포증식、조망급방사민감성적영향.방법 SiHa세포분위3조:실험조、음성대조조급공백대조조,기중실험조화음성대조조분별용siRNA#1 ～4화음성대조siRNA전염,공백대조조불주임하전염처리.용실시형광정량PCR화단백인적법검측각조세포hTERT mRNA화단백적표체,CCK-8법검측세포적증식정황,류식세포의검측각조세포조망솔,극륭형성실험통과단파다격모형의합계산D0、Dq치,검측세포적방사민감성.결과 전염후48 h급72 h,실험조siRNA#3hTERT mRNA급단백표체량교음성대조조하강,P＜0.05;전염96 h후실험조세포A치0.80±0.09,음성대조조위1.25 ±0.11,P=0.0054;전염후실험조조기조망솔(10.50 ±0.20)％교음성대조조(5.80±0.10)％명현증가,P ＜0.0001;실험조급음성대조조D0급Dq치분별위1.53 Gy、0.77 Gy화2.19 Gy、1.31 Gy,차이유통계학의의(P＜0.05).결론 siRNA능특이성하조SiHa세포중hTERT mRNA화단백수평적표체,제고세포적조기조망솔병억제세포증식활성,증강SiHa세포적방사민감성.
