CAJ | 학술논문

目的：探讨用FDA标记Mtb的最佳浓度，观察不同化学试剂和温度对FDA标记率的影响及PMNs杀伤 Mtb的活性。方法用不同浓度荧光素二醋酸酯（ FDA）标记Mtb，选取最佳标记浓度，在0℃冰浴，37℃、65℃和95℃水浴中孵育30 min，或与不同百分比的乙醇、甲醛和多聚甲醛（ PFA）试剂在室温下孵育30 min后洗涤，用流式细胞术检测标记率和荧光强度（ MFI）；Percoll分离获得 PMNs与FDA标记的 Mtb于37℃孵育7 min，洗涤，加入自体血清，置37℃孵育0～60 min，计算PMNs对Mtb的杀伤率。结果 Mtb用不同浓度FDA在PBS中标记的标记率分别从由85％增加到99％，MFI分别从45增加到1506；在0℃冰浴，37℃、65℃、95℃水浴作用30 min后，FDA－Mtb的标记率从0℃的99％下降至95℃的0．21％， MFI从0℃的2015下降至95℃时的87；FDA标记的Mtb与不同比例的常规化学试剂乙醇、甲醛、多聚甲醛分别作用30 min后，FDA－Mtb的MFI在各组均显著降低（P＜0．01）；FDA标记的 Mtb与分离 PMNs在37℃作用0 min、10 min、30 min和60 min，PMNs杀伤 Mtb的百分率分别是11．37％、12．02％、27．20％、58．44％。结论流式细胞术能快速准确地检测PMN对FDA标记Mtb的杀伤活性，且杀伤活性随时间延长而增强。
목적：탐토용FDA표기Mtb적최가농도，관찰불동화학시제화온도대FDA표기솔적영향급PMNs살상 Mtb적활성。방법용불동농도형광소이작산지（ FDA）표기Mtb，선취최가표기농도，재0℃빙욕，37℃、65℃화95℃수욕중부육30 min，혹여불동백분비적을순、갑철화다취갑철（ PFA）시제재실온하부육30 min후세조，용류식세포술검측표기솔화형광강도（ MFI）；Percoll분리획득 PMNs여FDA표기적 Mtb우37℃부육7 min，세조，가입자체혈청，치37℃부육0～60 min，계산PMNs대Mtb적살상솔。결과 Mtb용불동농도FDA재PBS중표기적표기솔분별종유85％증가도99％，MFI분별종45증가도1506；재0℃빙욕，37℃、65℃、95℃수욕작용30 min후，FDA－Mtb적표기솔종0℃적99％하강지95℃적0．21％， MFI종0℃적2015하강지95℃시적87；FDA표기적Mtb여불동비례적상규화학시제을순、갑철、다취갑철분별작용30 min후，FDA－Mtb적MFI재각조균현저강저（P＜0．01）；FDA표기적 Mtb여분리 PMNs재37℃작용0 min、10 min、30 min화60 min，PMNs살상 Mtb적백분솔분별시11．37％、12．02％、27．20％、58．44％。결론류식세포술능쾌속준학지검측PMN대FDA표기Mtb적살상활성，차살상활성수시간연장이증강。