青海医学院学报
青海醫學院學報
청해의학원학보
Journal of Qinghai Medical College
2015年
3期
163-170
,共8页
侯雪%魏晓星%张振明%蔺枭%吴琼
侯雪%魏曉星%張振明%藺梟%吳瓊
후설%위효성%장진명%린효%오경
miRNA-181a/b%血清反应因子%血管平滑肌细胞%表型转化
miRNA-181a/b%血清反應因子%血管平滑肌細胞%錶型轉化
miRNA-181a/b%혈청반응인자%혈관평활기세포%표형전화
目的 研究miR-181a/b通过血清反应因子(SRF,serum response factor)对血管平滑肌细胞向合成型表型转化及细胞增殖迁移能力的调控作用.方法 将miR-181a/b瞬时转染至人主动脉平滑肌细胞(HAoSMCs)中,用实时定量PCR、CCK-8检测方法和transwell实验分别检测平滑肌细胞的表型标记基因的表达水平、细胞增殖能力和迁移能力的变化.生物信息学分析预测miR-181a/b直接靶向血清反应因子的3'UTR(非编码区),并通过实时定量PCR、western blot 及双荧光素酶报告系统分另验证.结果 实时定量PCR结果表示在HAoSMCs中过表达miR-181a/b能够抑制收缩表型标记基因的表达,促进合成表型标记基因的表达,CCK-8与transwell实验结果表明,miR-181a/b可增强细胞的增殖和迁移能力.双荧光素酶报告系统与western blot结果表明,miR-181a/b能够直接作用SRF,抑制SRF的蛋白表达.结论 miR-181a/b通过直接作用血清反应因子的3'UTR促进平滑肌细胞由收缩型表型向合成型表型转化.
目的 研究miR-181a/b通過血清反應因子(SRF,serum response factor)對血管平滑肌細胞嚮閤成型錶型轉化及細胞增殖遷移能力的調控作用.方法 將miR-181a/b瞬時轉染至人主動脈平滑肌細胞(HAoSMCs)中,用實時定量PCR、CCK-8檢測方法和transwell實驗分彆檢測平滑肌細胞的錶型標記基因的錶達水平、細胞增殖能力和遷移能力的變化.生物信息學分析預測miR-181a/b直接靶嚮血清反應因子的3'UTR(非編碼區),併通過實時定量PCR、western blot 及雙熒光素酶報告繫統分另驗證.結果 實時定量PCR結果錶示在HAoSMCs中過錶達miR-181a/b能夠抑製收縮錶型標記基因的錶達,促進閤成錶型標記基因的錶達,CCK-8與transwell實驗結果錶明,miR-181a/b可增彊細胞的增殖和遷移能力.雙熒光素酶報告繫統與western blot結果錶明,miR-181a/b能夠直接作用SRF,抑製SRF的蛋白錶達.結論 miR-181a/b通過直接作用血清反應因子的3'UTR促進平滑肌細胞由收縮型錶型嚮閤成型錶型轉化.
목적 연구miR-181a/b통과혈청반응인자(SRF,serum response factor)대혈관평활기세포향합성형표형전화급세포증식천이능력적조공작용.방법 장miR-181a/b순시전염지인주동맥평활기세포(HAoSMCs)중,용실시정량PCR、CCK-8검측방법화transwell실험분별검측평활기세포적표형표기기인적표체수평、세포증식능력화천이능력적변화.생물신식학분석예측miR-181a/b직접파향혈청반응인자적3'UTR(비편마구),병통과실시정량PCR、western blot 급쌍형광소매보고계통분령험증.결과 실시정량PCR결과표시재HAoSMCs중과표체miR-181a/b능구억제수축표형표기기인적표체,촉진합성표형표기기인적표체,CCK-8여transwell실험결과표명,miR-181a/b가증강세포적증식화천이능력.쌍형광소매보고계통여western blot결과표명,miR-181a/b능구직접작용SRF,억제SRF적단백표체.결론 miR-181a/b통과직접작용혈청반응인자적3'UTR촉진평활기세포유수축형표형향합성형표형전화.
