临床肝胆病杂志
臨床肝膽病雜誌
림상간담병잡지
Journal of Clinical Hepatology
2015年
9期
1458-1463
,共6页
程康文%李琪%詹勇强%王成友%王贵和%倪勇%朱宝和%邓雪松
程康文%李琪%詹勇彊%王成友%王貴和%倪勇%硃寶和%鄧雪鬆
정강문%리기%첨용강%왕성우%왕귀화%예용%주보화%산설송
氟尿嘧啶%肝肿瘤%细胞系,肿瘤%肿瘤干细胞%抗药性,肿瘤
氟尿嘧啶%肝腫瘤%細胞繫,腫瘤%腫瘤榦細胞%抗藥性,腫瘤
불뇨밀정%간종류%세포계,종류%종류간세포%항약성,종류
fluorouracil%liver neoplasms%cell line,tumor%neoplastic stem cells%drug resistance,neoplasm
目的 研究化疗药物5-氟尿嘧啶(5-Fu)反复作用肝癌细胞株PLC/RAF/5后生物学特性的变化,探讨耐药肝癌细胞与肝癌干细胞之间的相关性.方法 用低浓度的5-Fu(1μg/ml)反复多次作用于人肝癌细胞株PLC/RAF/5后建立PLC/RAF/5/5-Fu细胞株,观察两种细胞的形态学差异.用CCK-8法检测不同浓度的5-Fu(0、0.25、0.5、1、1.5、2μg/rnl)对两种细胞增殖的抑制作用;在不同浓度的5-Fu(0.5、1、2μg/ml)作用48 h后,流式细胞仪分析不同浓度下两种细胞的凋亡情况;检测两种细胞中侧群细胞的比例;平板克隆集落实验比较两种细胞的克隆形成能力;Western Blot检测两种细胞中Bax、Bcl-2、ABCG2和FoxM1蛋白的表达情况.计量资料组间比较采用t检验.结果 用化疗药物5-Fu成功建立PLC/RAF/5/5-Fu细胞株.PLC/RAF/5/5-Fu细胞比PLC/RAF/5细胞体积大,突起减少,呈长梭形改变,折光性增强.与亲本细胞相比,PLC/RAF/5/5-Fu细胞对5-Fu增殖抑制作用的敏感性降低,细胞周期GO/G1期比例降低,而S期和G2/M期比例上升;抗凋亡能力增加;侧群细胞比例增加;增殖能力增强,上述差异均具有统计学意义(P值均＜0.05).Western Blot检测表明PLC/RAF/5/5-Fu细胞Bcl-2、FoxM1、ABCG2蛋白表达增强,而PLC/RAF/5细胞的Bax蛋白表达增强,差异具有统计学意义(P值均＜0.01).结论 细胞株PLC/RAF/5/5-Fu中肝癌干细胞可能是其耐药的根源;低浓度的5-Fu(1 μg/ml)可以富集肝癌干细胞样细胞.
目的 研究化療藥物5-氟尿嘧啶(5-Fu)反複作用肝癌細胞株PLC/RAF/5後生物學特性的變化,探討耐藥肝癌細胞與肝癌榦細胞之間的相關性.方法 用低濃度的5-Fu(1μg/ml)反複多次作用于人肝癌細胞株PLC/RAF/5後建立PLC/RAF/5/5-Fu細胞株,觀察兩種細胞的形態學差異.用CCK-8法檢測不同濃度的5-Fu(0、0.25、0.5、1、1.5、2μg/rnl)對兩種細胞增殖的抑製作用;在不同濃度的5-Fu(0.5、1、2μg/ml)作用48 h後,流式細胞儀分析不同濃度下兩種細胞的凋亡情況;檢測兩種細胞中側群細胞的比例;平闆剋隆集落實驗比較兩種細胞的剋隆形成能力;Western Blot檢測兩種細胞中Bax、Bcl-2、ABCG2和FoxM1蛋白的錶達情況.計量資料組間比較採用t檢驗.結果 用化療藥物5-Fu成功建立PLC/RAF/5/5-Fu細胞株.PLC/RAF/5/5-Fu細胞比PLC/RAF/5細胞體積大,突起減少,呈長梭形改變,摺光性增彊.與親本細胞相比,PLC/RAF/5/5-Fu細胞對5-Fu增殖抑製作用的敏感性降低,細胞週期GO/G1期比例降低,而S期和G2/M期比例上升;抗凋亡能力增加;側群細胞比例增加;增殖能力增彊,上述差異均具有統計學意義(P值均＜0.05).Western Blot檢測錶明PLC/RAF/5/5-Fu細胞Bcl-2、FoxM1、ABCG2蛋白錶達增彊,而PLC/RAF/5細胞的Bax蛋白錶達增彊,差異具有統計學意義(P值均＜0.01).結論 細胞株PLC/RAF/5/5-Fu中肝癌榦細胞可能是其耐藥的根源;低濃度的5-Fu(1 μg/ml)可以富集肝癌榦細胞樣細胞.
목적 연구화료약물5-불뇨밀정(5-Fu)반복작용간암세포주PLC/RAF/5후생물학특성적변화,탐토내약간암세포여간암간세포지간적상관성.방법 용저농도적5-Fu(1μg/ml)반복다차작용우인간암세포주PLC/RAF/5후건립PLC/RAF/5/5-Fu세포주,관찰량충세포적형태학차이.용CCK-8법검측불동농도적5-Fu(0、0.25、0.5、1、1.5、2μg/rnl)대량충세포증식적억제작용;재불동농도적5-Fu(0.5、1、2μg/ml)작용48 h후,류식세포의분석불동농도하량충세포적조망정황;검측량충세포중측군세포적비례;평판극륭집락실험비교량충세포적극륭형성능력;Western Blot검측량충세포중Bax、Bcl-2、ABCG2화FoxM1단백적표체정황.계량자료조간비교채용t검험.결과 용화료약물5-Fu성공건립PLC/RAF/5/5-Fu세포주.PLC/RAF/5/5-Fu세포비PLC/RAF/5세포체적대,돌기감소,정장사형개변,절광성증강.여친본세포상비,PLC/RAF/5/5-Fu세포대5-Fu증식억제작용적민감성강저,세포주기GO/G1기비례강저,이S기화G2/M기비례상승;항조망능력증가;측군세포비례증가;증식능력증강,상술차이균구유통계학의의(P치균＜0.05).Western Blot검측표명PLC/RAF/5/5-Fu세포Bcl-2、FoxM1、ABCG2단백표체증강,이PLC/RAF/5세포적Bax단백표체증강,차이구유통계학의의(P치균＜0.01).결론 세포주PLC/RAF/5/5-Fu중간암간세포가능시기내약적근원;저농도적5-Fu(1 μg/ml)가이부집간암간세포양세포.
