浙江农业学报
浙江農業學報
절강농업학보
Acta Agriculturae Zhejiangensis
2015年
10期
1822-1827
,共6页
C型产气荚膜梭菌%β2毒素%IPTG%乳糖
C型產氣莢膜梭菌%β2毒素%IPTG%乳糖
C형산기협막사균%β2독소%IPTG%유당
Clostridium perfringene type C%β2-toxin%IPTG%lactose
对产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)β2毒素基因的表达载体pETXB2进行限制性核酸内切酶酶切鉴定,并用SDS-PAGE检测了不同培养条件下,该毒素基因在埃希氏大肠杆菌(Escherichia coli) BL21(DE3)工程菌株中的表达情况.结果表明,pETXB2重组质粒中的β2毒素基因位于pET-28c(+)表达盒中,且阅读框架和基因序列正确.以IPTG为诱导剂时,重组菌株BL21(DE3)(pETXB2)的最佳培养条件为37℃,pH7.0,IPTG终浓度0.8 mmol· L-,诱导4h;以乳糖为诱导剂时,其最佳培养条件为37℃,pH 7.0,乳糖终浓度0.5 g·L-1,诱导5h.
對產氣莢膜梭菌(Clostridium perfringens)β2毒素基因的錶達載體pETXB2進行限製性覈痠內切酶酶切鑒定,併用SDS-PAGE檢測瞭不同培養條件下,該毒素基因在埃希氏大腸桿菌(Escherichia coli) BL21(DE3)工程菌株中的錶達情況.結果錶明,pETXB2重組質粒中的β2毒素基因位于pET-28c(+)錶達盒中,且閱讀框架和基因序列正確.以IPTG為誘導劑時,重組菌株BL21(DE3)(pETXB2)的最佳培養條件為37℃,pH7.0,IPTG終濃度0.8 mmol· L-,誘導4h;以乳糖為誘導劑時,其最佳培養條件為37℃,pH 7.0,乳糖終濃度0.5 g·L-1,誘導5h.
대산기협막사균(Clostridium perfringens)β2독소기인적표체재체pETXB2진행한제성핵산내절매매절감정,병용SDS-PAGE검측료불동배양조건하,해독소기인재애희씨대장간균(Escherichia coli) BL21(DE3)공정균주중적표체정황.결과표명,pETXB2중조질립중적β2독소기인위우pET-28c(+)표체합중,차열독광가화기인서렬정학.이IPTG위유도제시,중조균주BL21(DE3)(pETXB2)적최가배양조건위37℃,pH7.0,IPTG종농도0.8 mmol· L-,유도4h;이유당위유도제시,기최가배양조건위37℃,pH 7.0,유당종농도0.5 g·L-1,유도5h.
