中国酿造
中國釀造
중국양조
China Brewing
2015年
10期
27-31
,共5页
陈亚文%周晨妍%谢晶晶%索婧琪%魏阳阳%李同彪
陳亞文%週晨妍%謝晶晶%索婧琪%魏暘暘%李同彪
진아문%주신연%사정정%색청기%위양양%리동표
木聚糖酶%热稳定性%定点突变%中性氨基酸
木聚糖酶%熱穩定性%定點突變%中性氨基痠
목취당매%열은정성%정점돌변%중성안기산
xylanase%thermostability%site-directed mutagenesis%neutral amino acids residues
通过对黑曲霉(Aspergillus niger) XZ-3S木聚糖酶XynZF-2进行生物信息学分析,在N-端区域引入半胱氨酸,定点突变E27C,构建突变基因xyn-E27C,并在大肠杆菌BL21 (DE3)中表达.酶学性质分析发现,突变酶Xyn-E27C的最适温度为45℃,与原酶XynZF-2相比提高了5℃.在40℃条件下,突变酶Xyn-E27C的半衰期t1/240℃为100 min,相比原酶XynZF-2 (t1/245℃=55 min)提高了45 min.在45℃条件下,突变酶Xyn-E27C的半衰期t1/245℃为24 min,相比原酶XynZF-2(t1/245℃=7 min)提高了17 min;突变酶Xyn-E27C的最适pH值由5.0提高至5.5,而pH稳定范围均为5.0~9.0.因此,定点突变E27C对木聚糖酶XynZF-2的热稳定性以及最适pH值均有重要影响.
通過對黑麯黴(Aspergillus niger) XZ-3S木聚糖酶XynZF-2進行生物信息學分析,在N-耑區域引入半胱氨痠,定點突變E27C,構建突變基因xyn-E27C,併在大腸桿菌BL21 (DE3)中錶達.酶學性質分析髮現,突變酶Xyn-E27C的最適溫度為45℃,與原酶XynZF-2相比提高瞭5℃.在40℃條件下,突變酶Xyn-E27C的半衰期t1/240℃為100 min,相比原酶XynZF-2 (t1/245℃=55 min)提高瞭45 min.在45℃條件下,突變酶Xyn-E27C的半衰期t1/245℃為24 min,相比原酶XynZF-2(t1/245℃=7 min)提高瞭17 min;突變酶Xyn-E27C的最適pH值由5.0提高至5.5,而pH穩定範圍均為5.0~9.0.因此,定點突變E27C對木聚糖酶XynZF-2的熱穩定性以及最適pH值均有重要影響.
통과대흑곡매(Aspergillus niger) XZ-3S목취당매XynZF-2진행생물신식학분석,재N-단구역인입반광안산,정점돌변E27C,구건돌변기인xyn-E27C,병재대장간균BL21 (DE3)중표체.매학성질분석발현,돌변매Xyn-E27C적최괄온도위45℃,여원매XynZF-2상비제고료5℃.재40℃조건하,돌변매Xyn-E27C적반쇠기t1/240℃위100 min,상비원매XynZF-2 (t1/245℃=55 min)제고료45 min.재45℃조건하,돌변매Xyn-E27C적반쇠기t1/245℃위24 min,상비원매XynZF-2(t1/245℃=7 min)제고료17 min;돌변매Xyn-E27C적최괄pH치유5.0제고지5.5,이pH은정범위균위5.0~9.0.인차,정점돌변E27C대목취당매XynZF-2적열은정성이급최괄pH치균유중요영향.