长江大学学报(自科版)
長江大學學報(自科版)
장강대학학보(자과판)
Journal of Yangtze University (Natural Science Edition)
2015年
27期
20-23,29
,共5页
赵成成%魏春华%龚丽贞黄春芳%杨小燕
趙成成%魏春華%龔麗貞黃春芳%楊小燕
조성성%위춘화%공려정황춘방%양소연
猪瘟%E2基因%原核表达%多克隆抗体
豬瘟%E2基因%原覈錶達%多剋隆抗體
저온%E2기인%원핵표체%다극륭항체
以CSFV FJ‐1株为模板对猪瘟E2基因的主要抗原表位进行PCR扩增,得到大小为370bp的目的片段,将其连接到pET‐32a表达载体,转化BL21后利用IPTG诱导其表达, SDS‐PAGE 和Western blot分析表明,目的蛋白成功获得表达,大小约33?.5ku融合蛋白。利用Ni‐NTA agarose纯化蛋白、重组蛋白与弗氏完全佐剂充分乳化后免疫新西兰兔,多克隆抗体效价经间接ELISA检测可高达1∶6400。Western blo t结果表明该重组蛋白具有良好的反应原性,试验结果表明已成功获得猪瘟E2基因的多克隆抗体且能识别CSFV FJ‐1毒株。
以CSFV FJ‐1株為模闆對豬瘟E2基因的主要抗原錶位進行PCR擴增,得到大小為370bp的目的片段,將其連接到pET‐32a錶達載體,轉化BL21後利用IPTG誘導其錶達, SDS‐PAGE 和Western blot分析錶明,目的蛋白成功穫得錶達,大小約33?.5ku融閤蛋白。利用Ni‐NTA agarose純化蛋白、重組蛋白與弗氏完全佐劑充分乳化後免疫新西蘭兔,多剋隆抗體效價經間接ELISA檢測可高達1∶6400。Western blo t結果錶明該重組蛋白具有良好的反應原性,試驗結果錶明已成功穫得豬瘟E2基因的多剋隆抗體且能識彆CSFV FJ‐1毒株。
이CSFV FJ‐1주위모판대저온E2기인적주요항원표위진행PCR확증,득도대소위370bp적목적편단,장기련접도pET‐32a표체재체,전화BL21후이용IPTG유도기표체, SDS‐PAGE 화Western blot분석표명,목적단백성공획득표체,대소약33?.5ku융합단백。이용Ni‐NTA agarose순화단백、중조단백여불씨완전좌제충분유화후면역신서란토,다극륭항체효개경간접ELISA검측가고체1∶6400。Western blo t결과표명해중조단백구유량호적반응원성,시험결과표명이성공획득저온E2기인적다극륭항체차능식별CSFV FJ‐1독주。