牙体牙髓牙周病学杂志
牙體牙髓牙週病學雜誌
아체아수아주병학잡지
Chinese Journal of Conservative Dentistry
2015年
11期
639-644
,共6页
方颖%曾素娟%余湜%葛立宏
方穎%曾素娟%餘湜%葛立宏
방영%증소연%여식%갈립굉
碱性成纤维生长因子( bFGF)%牙龈间充质干细胞%细胞多向分化%细胞增殖
堿性成纖維生長因子( bFGF)%牙齦間充質榦細胞%細胞多嚮分化%細胞增殖
감성성섬유생장인자( bFGF)%아간간충질간세포%세포다향분화%세포증식
basic fibroblast growth factor(bFGF)%gingiva-derived mesenchymal stem cells(GMSCs)%cell differentiation%cell proliferation
目的：体外研究碱性成纤维生长因子( bFGF)对牙龈间充质干细胞( GMSCs)生物学特性的影响。方法：酶消化法获得原代人牙龈间充质干细胞( hGMSCs),并采用有限稀释法进行克隆纯化培养。取第3代hGMSCs,观察5~20 ng/mL不同浓度bFGF对hGMSCs增殖的影响；观察10 ng/mL bFGF对hGMSCs克隆形成能力和ALP活性的影响；通过茜素红染色、油红0染色,观察10 ng/mL bFGF对hGMSCs体外成骨、成脂分化能力的影响,并RT-PCR检测各成骨、成脂分化相关基因的表达水平；同时采用流式细胞术检测10 ng/mL bFGF对hGMSCs表面标志物STRO-1表达的影响。结果：10 ng/mL的bFGF对hGMSCs的增殖、干细胞表面标志物STRO-1的表达、hGMSCs克隆形成率、脂滴形成量以及LPL、PPARγ各成脂基因的表达水平均有明显的促进作用(P<0.05)；但对hGMSCs的ALP活性,及其成骨分化过程中矿化结节的形成量、各成骨相关基因(ALP、OCN、BSP)的表达水平均有明显的抑制作用(P<0.05)。结论：在一定的培养条件下,bFGF可增加hGMSCs的干细胞表面标志物的表达、促进hGMSCs的增殖能力；并对hGMSCs的多向分化能力起调节作用。
目的：體外研究堿性成纖維生長因子( bFGF)對牙齦間充質榦細胞( GMSCs)生物學特性的影響。方法：酶消化法穫得原代人牙齦間充質榦細胞( hGMSCs),併採用有限稀釋法進行剋隆純化培養。取第3代hGMSCs,觀察5~20 ng/mL不同濃度bFGF對hGMSCs增殖的影響；觀察10 ng/mL bFGF對hGMSCs剋隆形成能力和ALP活性的影響；通過茜素紅染色、油紅0染色,觀察10 ng/mL bFGF對hGMSCs體外成骨、成脂分化能力的影響,併RT-PCR檢測各成骨、成脂分化相關基因的錶達水平；同時採用流式細胞術檢測10 ng/mL bFGF對hGMSCs錶麵標誌物STRO-1錶達的影響。結果：10 ng/mL的bFGF對hGMSCs的增殖、榦細胞錶麵標誌物STRO-1的錶達、hGMSCs剋隆形成率、脂滴形成量以及LPL、PPARγ各成脂基因的錶達水平均有明顯的促進作用(P<0.05)；但對hGMSCs的ALP活性,及其成骨分化過程中礦化結節的形成量、各成骨相關基因(ALP、OCN、BSP)的錶達水平均有明顯的抑製作用(P<0.05)。結論：在一定的培養條件下,bFGF可增加hGMSCs的榦細胞錶麵標誌物的錶達、促進hGMSCs的增殖能力；併對hGMSCs的多嚮分化能力起調節作用。
목적：체외연구감성성섬유생장인자( bFGF)대아간간충질간세포( GMSCs)생물학특성적영향。방법：매소화법획득원대인아간간충질간세포( hGMSCs),병채용유한희석법진행극륭순화배양。취제3대hGMSCs,관찰5~20 ng/mL불동농도bFGF대hGMSCs증식적영향；관찰10 ng/mL bFGF대hGMSCs극륭형성능력화ALP활성적영향；통과천소홍염색、유홍0염색,관찰10 ng/mL bFGF대hGMSCs체외성골、성지분화능력적영향,병RT-PCR검측각성골、성지분화상관기인적표체수평；동시채용류식세포술검측10 ng/mL bFGF대hGMSCs표면표지물STRO-1표체적영향。결과：10 ng/mL적bFGF대hGMSCs적증식、간세포표면표지물STRO-1적표체、hGMSCs극륭형성솔、지적형성량이급LPL、PPARγ각성지기인적표체수평균유명현적촉진작용(P<0.05)；단대hGMSCs적ALP활성,급기성골분화과정중광화결절적형성량、각성골상관기인(ALP、OCN、BSP)적표체수평균유명현적억제작용(P<0.05)。결론：재일정적배양조건하,bFGF가증가hGMSCs적간세포표면표지물적표체、촉진hGMSCs적증식능력；병대hGMSCs적다향분화능력기조절작용。
AIM:To investigate the effects of basic fibroblast growth factor ( bFGF) on the biological char-actor of gingiva-derived mesenchymal stem cells ( GMSCs) in vitro. METHODS:GMSCs were isolated from human healthy gingival tissue samples. Proliferation, colony formation, alkaline phosphatase ( ALP) activity, STRO-1 expres-sion, osteogenic and adipogenic differentiation of GMSCs cultured in the presence or absence of bFGF, were evaluated. RESULTS:Treatment with 10 ng/mL bFGF significantly increased the proliferation and STRO-1 expression of GM-SCs. bFGF also increased oil red O staining following adipogenic induction and the expression of PPARγ and LPL of GMSCs. In contrast, it reduced the ALP activity and mineral nodule formation;inhibited the gene expression of ALP, OCN and BSP of GMSCs. CONCLUSION:Under certain conditions, bFGF enhances GMSCs stemness by up-regula-ting stem cell gene expression, increasing proliferation ability, and may regulate the differentiation potency of GMSCs.
