中国血液净化
中國血液淨化
중국혈액정화
Chinese Journal of Blood Purification
2015年
11期
676-680
,共5页
脑型失衡综合症%尿素转运蛋白%慢性肾衰竭%水通道蛋白%脑水肿
腦型失衡綜閤癥%尿素轉運蛋白%慢性腎衰竭%水通道蛋白%腦水腫
뇌형실형종합증%뇨소전운단백%만성신쇠갈%수통도단백%뇌수종
Brain-type dialysis disequilibrium syndrome%Urea transport protein%Chronic renal failure%Aquaporin%Brain edema
目的 探讨水通道蛋白1,5及尿素转运蛋白B1在慢性肾衰竭小鼠脑组织中表达水平的变化及影响,进一步揭示血液透析脑型失衡综合征可能的分子基础. 方法 选用6～8周龄,雄性BALB/c小鼠,将小鼠分为正常组(N)、假手术组(S)和慢性肾衰竭模型组(CRF组).CRF模型小鼠通过对其右肾2/3肾皮质透热毁损,并在1周后将左肾完全切除的方法建立.假手术组小鼠只进行麻醉和手术切口,肾脏不做处理.正常组的小鼠不做任何处理.模型建立后10、40和70天3个时间点每组各处死5只小鼠,并留取小鼠的肾脏、血清和脑组织标本.检测三组小鼠肾组织病理、血清肌酐和尿素氮;用Western Blotting方法测定在造模后10天、40天和70天3组小鼠脑组织内水通道蛋白1,5(Aquaporin,AQP)及尿素转运蛋白B1(Urea Transportprotein,UT-B1)的表达.结果 CRF模型组在造模后10天肾组织病理结果显示部分肾小囊扩张,球囊粘连,肾小管上皮细胞颗粒样变性.造模后40天、70天表现为部分肾小球增生硬化,部分肾小管萎缩.造模10,40,70,天CRF模型组血清肌酐分别是(841.80±336.93)umol/L、(1885.17±689.49)umol/L、(1276.56±496.09)umol/L,与正常组和假手术组肌酐值相比均显著升高(10d:F=26.768,P=0.007;40d: F=34.928,P=0.004;70d.: F29.998,P=0.005),提示慢性肾衰竭模型成功.Western Blotting检测实验各组脑组织AQP1、AQP5及UT-B1的表达,结果显示:在造模10,40,70天,CRF模型组UT B1均未表达,正常组及假手术组表达差别无统计学意义.在造模后10天正常组AQP1表达量与假手术组及CRF组比较均有统计学差异(P＜0.05).CRF模型组较正常组AQP1表达量升高46.67％(t=0.122,P=0.001);AQP-5表达量较正常组升高41.09％(t=0.012,P=0.001).在造模后40天,假手术组与正常组AQP-1,5表达量无显著性差异;而CRF模型组AQP-1表达量较正常组升高28.98％(t=4.926,p=0.001),AQP-5表达量较正常组升高20.83％(t=0.857,P=0.003).在造模后70天,假手术组与正常组AQP-1,5表达量无显著性差异,而CRF模型组AQP-1表达量较正常组升高30.26％(t=8.471,P=0.001);AQP-5表达较正常组升高45.67％(t=3.352,P=0.001).结论 CRF模型小鼠脑组织AQP1,5的表达明显增加,同时伴有尿素转运蛋白B1的不表达或表达明显下降,这一结果为揭示脑型失衡综合症提供了线索.脑组织尿素转运蛋白的低表达导致快速血液透析脑中尿素清除延迟,进而形成脑血尿素浓度梯度,驱动水分通过过多表达的水道蛋白进入脑组织,导致脑水肿.
目的 探討水通道蛋白1,5及尿素轉運蛋白B1在慢性腎衰竭小鼠腦組織中錶達水平的變化及影響,進一步揭示血液透析腦型失衡綜閤徵可能的分子基礎. 方法 選用6～8週齡,雄性BALB/c小鼠,將小鼠分為正常組(N)、假手術組(S)和慢性腎衰竭模型組(CRF組).CRF模型小鼠通過對其右腎2/3腎皮質透熱燬損,併在1週後將左腎完全切除的方法建立.假手術組小鼠隻進行痳醉和手術切口,腎髒不做處理.正常組的小鼠不做任何處理.模型建立後10、40和70天3箇時間點每組各處死5隻小鼠,併留取小鼠的腎髒、血清和腦組織標本.檢測三組小鼠腎組織病理、血清肌酐和尿素氮;用Western Blotting方法測定在造模後10天、40天和70天3組小鼠腦組織內水通道蛋白1,5(Aquaporin,AQP)及尿素轉運蛋白B1(Urea Transportprotein,UT-B1)的錶達.結果 CRF模型組在造模後10天腎組織病理結果顯示部分腎小囊擴張,毬囊粘連,腎小管上皮細胞顆粒樣變性.造模後40天、70天錶現為部分腎小毬增生硬化,部分腎小管萎縮.造模10,40,70,天CRF模型組血清肌酐分彆是(841.80±336.93)umol/L、(1885.17±689.49)umol/L、(1276.56±496.09)umol/L,與正常組和假手術組肌酐值相比均顯著升高(10d:F=26.768,P=0.007;40d: F=34.928,P=0.004;70d.: F29.998,P=0.005),提示慢性腎衰竭模型成功.Western Blotting檢測實驗各組腦組織AQP1、AQP5及UT-B1的錶達,結果顯示:在造模10,40,70天,CRF模型組UT B1均未錶達,正常組及假手術組錶達差彆無統計學意義.在造模後10天正常組AQP1錶達量與假手術組及CRF組比較均有統計學差異(P＜0.05).CRF模型組較正常組AQP1錶達量升高46.67％(t=0.122,P=0.001);AQP-5錶達量較正常組升高41.09％(t=0.012,P=0.001).在造模後40天,假手術組與正常組AQP-1,5錶達量無顯著性差異;而CRF模型組AQP-1錶達量較正常組升高28.98％(t=4.926,p=0.001),AQP-5錶達量較正常組升高20.83％(t=0.857,P=0.003).在造模後70天,假手術組與正常組AQP-1,5錶達量無顯著性差異,而CRF模型組AQP-1錶達量較正常組升高30.26％(t=8.471,P=0.001);AQP-5錶達較正常組升高45.67％(t=3.352,P=0.001).結論 CRF模型小鼠腦組織AQP1,5的錶達明顯增加,同時伴有尿素轉運蛋白B1的不錶達或錶達明顯下降,這一結果為揭示腦型失衡綜閤癥提供瞭線索.腦組織尿素轉運蛋白的低錶達導緻快速血液透析腦中尿素清除延遲,進而形成腦血尿素濃度梯度,驅動水分通過過多錶達的水道蛋白進入腦組織,導緻腦水腫.
목적 탐토수통도단백1,5급뇨소전운단백B1재만성신쇠갈소서뇌조직중표체수평적변화급영향,진일보게시혈액투석뇌형실형종합정가능적분자기출. 방법 선용6～8주령,웅성BALB/c소서,장소서분위정상조(N)、가수술조(S)화만성신쇠갈모형조(CRF조).CRF모형소서통과대기우신2/3신피질투열훼손,병재1주후장좌신완전절제적방법건립.가수술조소서지진행마취화수술절구,신장불주처리.정상조적소서불주임하처리.모형건립후10、40화70천3개시간점매조각처사5지소서,병류취소서적신장、혈청화뇌조직표본.검측삼조소서신조직병리、혈청기항화뇨소담;용Western Blotting방법측정재조모후10천、40천화70천3조소서뇌조직내수통도단백1,5(Aquaporin,AQP)급뇨소전운단백B1(Urea Transportprotein,UT-B1)적표체.결과 CRF모형조재조모후10천신조직병리결과현시부분신소낭확장,구낭점련,신소관상피세포과립양변성.조모후40천、70천표현위부분신소구증생경화,부분신소관위축.조모10,40,70,천CRF모형조혈청기항분별시(841.80±336.93)umol/L、(1885.17±689.49)umol/L、(1276.56±496.09)umol/L,여정상조화가수술조기항치상비균현저승고(10d:F=26.768,P=0.007;40d: F=34.928,P=0.004;70d.: F29.998,P=0.005),제시만성신쇠갈모형성공.Western Blotting검측실험각조뇌조직AQP1、AQP5급UT-B1적표체,결과현시:재조모10,40,70천,CRF모형조UT B1균미표체,정상조급가수술조표체차별무통계학의의.재조모후10천정상조AQP1표체량여가수술조급CRF조비교균유통계학차이(P＜0.05).CRF모형조교정상조AQP1표체량승고46.67％(t=0.122,P=0.001);AQP-5표체량교정상조승고41.09％(t=0.012,P=0.001).재조모후40천,가수술조여정상조AQP-1,5표체량무현저성차이;이CRF모형조AQP-1표체량교정상조승고28.98％(t=4.926,p=0.001),AQP-5표체량교정상조승고20.83％(t=0.857,P=0.003).재조모후70천,가수술조여정상조AQP-1,5표체량무현저성차이,이CRF모형조AQP-1표체량교정상조승고30.26％(t=8.471,P=0.001);AQP-5표체교정상조승고45.67％(t=3.352,P=0.001).결론 CRF모형소서뇌조직AQP1,5적표체명현증가,동시반유뇨소전운단백B1적불표체혹표체명현하강,저일결과위게시뇌형실형종합증제공료선색.뇌조직뇨소전운단백적저표체도치쾌속혈액투석뇌중뇨소청제연지,진이형성뇌혈뇨소농도제도,구동수분통과과다표체적수도단백진입뇌조직,도치뇌수종.
