草食家畜
草食傢畜
초식가축
Grass-feeding Livestock
2015年
5期
25-30
,共6页
刘来珍%孙志华%刘娟%史静雪%陈创夫%张辉
劉來珍%孫誌華%劉娟%史靜雪%陳創伕%張輝
류래진%손지화%류연%사정설%진창부%장휘
布鲁氏菌%BMEI0580基因%原核表达
佈魯氏菌%BMEI0580基因%原覈錶達
포로씨균%BMEI0580기인%원핵표체
[目的]构建布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统蛋白BMEI0580基因的原核表达载体,并进行免疫原性及其对人胚胎滋养层细胞(HPT-8)细胞因子表达量影响的分析.[方法]本研究从羊种布鲁氏菌(B.melitensis)标准株16M的基因组中克隆BMEI0580基因片段,亚克隆到pMD19-T载体中并测序,克隆至表达载体pET-28a,构建重组质粒pET-28a-BMEI0580利用大肠杆菌进行表达,并进行Western-Blot检测,ELISA方法检测细胞因子的表达量.[结果]成功构建了pET-28a-BMEI0580原核表达载体,并在大肠杆菌中成功表达了BMEI0580基因,经过SDS-PAGE检测,重组蛋白的分子量大约是57kDa,Western-Blot检测其具有免疫特性.[结论]本实验成功表达了布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统蛋白BMEI0580基因,为进一步研究其免疫性和保护性奠定了基础.
[目的]構建佈魯氏菌Ⅳ型分泌繫統蛋白BMEI0580基因的原覈錶達載體,併進行免疫原性及其對人胚胎滋養層細胞(HPT-8)細胞因子錶達量影響的分析.[方法]本研究從羊種佈魯氏菌(B.melitensis)標準株16M的基因組中剋隆BMEI0580基因片段,亞剋隆到pMD19-T載體中併測序,剋隆至錶達載體pET-28a,構建重組質粒pET-28a-BMEI0580利用大腸桿菌進行錶達,併進行Western-Blot檢測,ELISA方法檢測細胞因子的錶達量.[結果]成功構建瞭pET-28a-BMEI0580原覈錶達載體,併在大腸桿菌中成功錶達瞭BMEI0580基因,經過SDS-PAGE檢測,重組蛋白的分子量大約是57kDa,Western-Blot檢測其具有免疫特性.[結論]本實驗成功錶達瞭佈魯氏菌Ⅳ型分泌繫統蛋白BMEI0580基因,為進一步研究其免疫性和保護性奠定瞭基礎.
[목적]구건포로씨균Ⅳ형분비계통단백BMEI0580기인적원핵표체재체,병진행면역원성급기대인배태자양층세포(HPT-8)세포인자표체량영향적분석.[방법]본연구종양충포로씨균(B.melitensis)표준주16M적기인조중극륭BMEI0580기인편단,아극륭도pMD19-T재체중병측서,극륭지표체재체pET-28a,구건중조질립pET-28a-BMEI0580이용대장간균진행표체,병진행Western-Blot검측,ELISA방법검측세포인자적표체량.[결과]성공구건료pET-28a-BMEI0580원핵표체재체,병재대장간균중성공표체료BMEI0580기인,경과SDS-PAGE검측,중조단백적분자량대약시57kDa,Western-Blot검측기구유면역특성.[결론]본실험성공표체료포로씨균Ⅳ형분비계통단백BMEI0580기인,위진일보연구기면역성화보호성전정료기출.
