基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
Basic & Clinical Medicine
2015年
11期
1492-1498
,共7页
高歌%申甲梅%段春礼%王雪%鲁玲玲%张建亮%杨慧
高歌%申甲梅%段春禮%王雪%魯玲玲%張建亮%楊慧
고가%신갑매%단춘례%왕설%로령령%장건량%양혜
α-突触核蛋白%α-突触核蛋白氨基端%ROS%线粒体膜电势%线粒体渗透性转运孔
α-突觸覈蛋白%α-突觸覈蛋白氨基耑%ROS%線粒體膜電勢%線粒體滲透性轉運孔
α-돌촉핵단백%α-돌촉핵단백안기단%ROS%선립체막전세%선립체삼투성전운공
α-synuclein%α-syn/N%ROS%mitochondrial membrane potential (△Ψm)%mitochondrial permeability pore (mPTP)
目的 在MN9D细胞中,探讨α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)氨基端(α-syn/N),NAC区,及C端(α-syn/C)对细胞及线粒体的作用.方法 将细胞分为未处理组(control),空载体组(Myc),α-syn过表达组(α-syn),α-syn/N过表达组(α-syn/N),α-syn/delN过表达组(α-syn/delN),α-syn/NAC过表达组(α-syn/NAC),α-syn/C过表达组(α-syn/C),α-syn/delC过表达组(α-syn/delC)并瞬时转染α-syn各结构域48 h.用MTT和LDH法检测过表达α-syn各个结构域对细胞活力及LDH释放情况的影响,通过共聚焦显微镜及流式细胞仪检测细胞内ROS水平,线粒体渗透性转运孔(mPTP)的开放情况及线粒体膜电势(△Ψm)变化,用免疫荧光染色检测线粒体形态.结果 过表达α-syn,α-syn/N,α-syn/delC能使细胞活力下降(P＜0.01),LDH的释放量明显增加(P＜0.01),细胞内活性氧(ROS)水平增加(P＜0.001),线粒体渗透性转运孔(mPTP)异常开放增加(P＜0.01),线粒体膜电势下降(P＜0.01).并且过表达α-syn/N后,55％的线粒体出现气球样改变.结论 α-syn通过其氨基端引起线粒体膜损伤.
目的 在MN9D細胞中,探討α-突觸覈蛋白(α-synuclein,α-syn)氨基耑(α-syn/N),NAC區,及C耑(α-syn/C)對細胞及線粒體的作用.方法 將細胞分為未處理組(control),空載體組(Myc),α-syn過錶達組(α-syn),α-syn/N過錶達組(α-syn/N),α-syn/delN過錶達組(α-syn/delN),α-syn/NAC過錶達組(α-syn/NAC),α-syn/C過錶達組(α-syn/C),α-syn/delC過錶達組(α-syn/delC)併瞬時轉染α-syn各結構域48 h.用MTT和LDH法檢測過錶達α-syn各箇結構域對細胞活力及LDH釋放情況的影響,通過共聚焦顯微鏡及流式細胞儀檢測細胞內ROS水平,線粒體滲透性轉運孔(mPTP)的開放情況及線粒體膜電勢(△Ψm)變化,用免疫熒光染色檢測線粒體形態.結果 過錶達α-syn,α-syn/N,α-syn/delC能使細胞活力下降(P＜0.01),LDH的釋放量明顯增加(P＜0.01),細胞內活性氧(ROS)水平增加(P＜0.001),線粒體滲透性轉運孔(mPTP)異常開放增加(P＜0.01),線粒體膜電勢下降(P＜0.01).併且過錶達α-syn/N後,55％的線粒體齣現氣毬樣改變.結論 α-syn通過其氨基耑引起線粒體膜損傷.
목적 재MN9D세포중,탐토α-돌촉핵단백(α-synuclein,α-syn)안기단(α-syn/N),NAC구,급C단(α-syn/C)대세포급선립체적작용.방법 장세포분위미처리조(control),공재체조(Myc),α-syn과표체조(α-syn),α-syn/N과표체조(α-syn/N),α-syn/delN과표체조(α-syn/delN),α-syn/NAC과표체조(α-syn/NAC),α-syn/C과표체조(α-syn/C),α-syn/delC과표체조(α-syn/delC)병순시전염α-syn각결구역48 h.용MTT화LDH법검측과표체α-syn각개결구역대세포활력급LDH석방정황적영향,통과공취초현미경급류식세포의검측세포내ROS수평,선립체삼투성전운공(mPTP)적개방정황급선립체막전세(△Ψm)변화,용면역형광염색검측선립체형태.결과 과표체α-syn,α-syn/N,α-syn/delC능사세포활력하강(P＜0.01),LDH적석방량명현증가(P＜0.01),세포내활성양(ROS)수평증가(P＜0.001),선립체삼투성전운공(mPTP)이상개방증가(P＜0.01),선립체막전세하강(P＜0.01).병차과표체α-syn/N후,55％적선립체출현기구양개변.결론 α-syn통과기안기단인기선립체막손상.
