延边大学农学学报
延邊大學農學學報
연변대학농학학보
Journal of Agricultural Science Yanbian University
2015年
3期
183-187
,共5页
宫赫阳%李鹏%吴委林%康泽然%王延禹%郑大浩
宮赫暘%李鵬%吳委林%康澤然%王延禹%鄭大浩
궁혁양%리붕%오위림%강택연%왕연우%정대호
玉米%高蛋氨酸蛋白%dzs18基因%原核表达载体
玉米%高蛋氨痠蛋白%dzs18基因%原覈錶達載體
옥미%고단안산단백%dzs18기인%원핵표체재체
为将玉米高蛋氨酸蛋白基因在原核细胞中加以表达、培育高蛋氨酸水平的益生菌并用于提高动物饲料的蛋氨酸含量,本研究采用PCR克隆的方法,从玉米自交系B73中克隆出目的基因dzs18.结果表明:目标DNA序列长度729 bp;目的基因编码由211个氨基酸组成的富含蛋氨酸的18kD δ-zein,其蛋氨酸残基数(50)占总氨基酸数量的23.7％.该蛋白质氨基酸序列的中部,即第75个氨基酸到第167个氨基酸之间,存在1个由93个氨基酸序列构成的蛋氨酸高密区,蛋氨酸残基数(41)所占比率为44.1％.利用所克隆的B73-dzs18,成功构建出dzs18基因的原核表达载体pGEX4T1-dzs18;目的基因正确插入到载体中GST标签基因的下游;序列测定证明,目的基因dzs18与GST标签基因构成具有无移码突变、连读阅读的GST-dzs18融合基因.
為將玉米高蛋氨痠蛋白基因在原覈細胞中加以錶達、培育高蛋氨痠水平的益生菌併用于提高動物飼料的蛋氨痠含量,本研究採用PCR剋隆的方法,從玉米自交繫B73中剋隆齣目的基因dzs18.結果錶明:目標DNA序列長度729 bp;目的基因編碼由211箇氨基痠組成的富含蛋氨痠的18kD δ-zein,其蛋氨痠殘基數(50)佔總氨基痠數量的23.7％.該蛋白質氨基痠序列的中部,即第75箇氨基痠到第167箇氨基痠之間,存在1箇由93箇氨基痠序列構成的蛋氨痠高密區,蛋氨痠殘基數(41)所佔比率為44.1％.利用所剋隆的B73-dzs18,成功構建齣dzs18基因的原覈錶達載體pGEX4T1-dzs18;目的基因正確插入到載體中GST標籤基因的下遊;序列測定證明,目的基因dzs18與GST標籤基因構成具有無移碼突變、連讀閱讀的GST-dzs18融閤基因.
위장옥미고단안산단백기인재원핵세포중가이표체、배육고단안산수평적익생균병용우제고동물사료적단안산함량,본연구채용PCR극륭적방법,종옥미자교계B73중극륭출목적기인dzs18.결과표명:목표DNA서렬장도729 bp;목적기인편마유211개안기산조성적부함단안산적18kD δ-zein,기단안산잔기수(50)점총안기산수량적23.7％.해단백질안기산서렬적중부,즉제75개안기산도제167개안기산지간,존재1개유93개안기산서렬구성적단안산고밀구,단안산잔기수(41)소점비솔위44.1％.이용소극륭적B73-dzs18,성공구건출dzs18기인적원핵표체재체pGEX4T1-dzs18;목적기인정학삽입도재체중GST표첨기인적하유;서렬측정증명,목적기인dzs18여GST표첨기인구성구유무이마돌변、련독열독적GST-dzs18융합기인.
