CAJ | 학술논문

目的:观察尼氟灭酸(niflumic acid,NFA)干预后,TMEM 16A在坐骨神经压榨性损伤(chronic constriction injury,CCI)模型鼠背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)神经元上的表达,研究TMEM16A是否参与神经病理性疼痛.方法:制备CCI模型,热板实验检测热缩足反射潜伏期(thermalwithdrawal latency,TWL).在模型制备后第ld开始以腹腔注射形式给予不同浓度的NFA干预14d,取大鼠L4～6 DRG神经元进行实验.免疫荧光实验明确TMEM16A在DRG神经元中的分布;运用RT-PCR技术和Westem Blot技术在给予不同浓度NFA干预后,检测CCI模型DRG神经元上TMEM 16A的mRNA水平和蛋白的表达.结果:(1) CCI组的TWL较正常组明显缩短,给予10 μM、50 μM和300 μM的NFA干预后,各组TWL较CCI组均明显延长(P＜0.01,刀=6);50μM的NFA干预组较10 μM的NFA干预组TWL也明显延长(P＜0.05,n=6);但300 μM的NFA干预组与50 μM的NFA干预组相比,TWL时间差异无统计学意义. (2)免疫荧光显示TMEM16A主要存在于DRG神经元上;(3) CCI组mRNA水平较正常组明显增高;随着NFA浓度的增加,DRG神经元TMEM 16A的mRNA水平较CCI组逐渐降低,差异具有统计学意义(P＜ 0.01,n=6). (4) CCI组TMEM16A蛋白表达较正常组的明显增高;随着NFA浓度的增加,DRG神经元上TMEM16A蛋白表达较CCI组逐渐减低,差异具有统计学意义(P＜ 0.01,n=6).结论:尼氟灭酸能抑制神经病理性疼痛大鼠DRG神经元TMEM16A的表达,而且与尼氟灭酸的剂量相关,提示钙激活氯通道可能参与或调控神经病理性疼痛的发生.
목적:관찰니불멸산(niflumic acid,NFA)간예후,TMEM 16A재좌골신경압자성손상(chronic constriction injury,CCI)모형서배근신경절(dorsal root ganglion,DRG)신경원상적표체,연구TMEM16A시부삼여신경병이성동통.방법:제비CCI모형,열판실험검측열축족반사잠복기(thermalwithdrawal latency,TWL).재모형제비후제ld개시이복강주사형식급여불동농도적NFA간예14d,취대서L4～6 DRG신경원진행실험.면역형광실험명학TMEM16A재DRG신경원중적분포;운용RT-PCR기술화Westem Blot기술재급여불동농도NFA간예후,검측CCI모형DRG신경원상TMEM 16A적mRNA수평화단백적표체.결과:(1) CCI조적TWL교정상조명현축단,급여10 μM、50 μM화300 μM적NFA간예후,각조TWL교CCI조균명현연장(P＜0.01,도=6);50μM적NFA간예조교10 μM적NFA간예조TWL야명현연장(P＜0.05,n=6);단300 μM적NFA간예조여50 μM적NFA간예조상비,TWL시간차이무통계학의의. (2)면역형광현시TMEM16A주요존재우DRG신경원상;(3) CCI조mRNA수평교정상조명현증고;수착NFA농도적증가,DRG신경원TMEM 16A적mRNA수평교CCI조축점강저,차이구유통계학의의(P＜ 0.01,n=6). (4) CCI조TMEM16A단백표체교정상조적명현증고;수착NFA농도적증가,DRG신경원상TMEM16A단백표체교CCI조축점감저,차이구유통계학의의(P＜ 0.01,n=6).결론:니불멸산능억제신경병이성동통대서DRG신경원TMEM16A적표체,이차여니불멸산적제량상관,제시개격활록통도가능삼여혹조공신경병이성동통적발생.