实验动物与比较医学
實驗動物與比較醫學
실험동물여비교의학
Laboratory Animal and Comparative Medicine
2015年
5期
367-373
,共7页
顾云浩%曹晨洁%胡碧原%王俊%韩东冬%许爱华
顧雲浩%曹晨潔%鬍碧原%王俊%韓東鼕%許愛華
고운호%조신길%호벽원%왕준%한동동%허애화
顺铂+氟尿嘧啶+环磷酰胺(PFC)%多药耐药(MDR)%S180细胞株%体内%细胞膜P-糖蛋白(P-gp)%MDR-1 mRNA%多药耐药相关蛋白-1(MRP-1)mRNA
順鉑+氟尿嘧啶+環燐酰胺(PFC)%多藥耐藥(MDR)%S180細胞株%體內%細胞膜P-糖蛋白(P-gp)%MDR-1 mRNA%多藥耐藥相關蛋白-1(MRP-1)mRNA
순박+불뇨밀정+배린선알(PFC)%다약내약(MDR)%S180세포주%체내%세포막P-당단백(P-gp)%MDR-1 mRNA%다약내약상관단백-1(MRP-1)mRNA
cis-Dichlorodiamineplatinum+5-Fluorouracil+cyclophosphamide (PFC)%Multidrug resistance%S180 cell line%in vivo%P-gp%multidrug resistance-1(MDR-1mRNA)%multidrug resistance-associated protein-1 (MRP-1 mRNA)
目的 小鼠体内诱导建立获得性S180多药耐药(multi-drug resistance,MDR)模型及其稳定性观察.方法 模拟临床顺铂+氟尿嘧啶+环磷酰胺(PFC)化疗方案给药,分三个阶段剂量递增法诱导S180腹水瘤小鼠,建立获得性S180MDR实验模型.采用噻唑蓝(MTT)法、流式细胞术动态检测各阶段所诱导细胞对化疗药物的耐药倍数、细胞内药物积累量及细胞膜P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)功能活性,并通过检测以上指标观察各阶段所诱导细胞停药后的耐药稳定性;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各阶段所诱导细胞MDR-1 mRNA、多药耐药相关蛋白-1 (multidrug resistance-associated protein 1,MRP-1) mRNA的表达量.结果 与亲本细胞对照组比较,各阶段所诱导S180细胞对化疗药物的耐药倍数随着诱导时间延长和剂量增高而逐渐增大,细胞内阿霉素(adriamycin,ADR)积累量逐渐减少,细胞P-gp功能活性逐渐增强;各阶段所诱导S180细胞MDR-1mRNA、MRP-1 mRNA的表达量也与诱导时间和给药剂量呈正相关;第一、二和三阶段所诱导细胞的稳定耐药时间分别为1周、2周和3周左右.结论 模拟临床PFC化疗方案给药,采用分阶段剂量递增小鼠体内诱导法可建立耐药强度高、稳定时间长的获得性S 180MDR实验模型.
目的 小鼠體內誘導建立穫得性S180多藥耐藥(multi-drug resistance,MDR)模型及其穩定性觀察.方法 模擬臨床順鉑+氟尿嘧啶+環燐酰胺(PFC)化療方案給藥,分三箇階段劑量遞增法誘導S180腹水瘤小鼠,建立穫得性S180MDR實驗模型.採用噻唑藍(MTT)法、流式細胞術動態檢測各階段所誘導細胞對化療藥物的耐藥倍數、細胞內藥物積纍量及細胞膜P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)功能活性,併通過檢測以上指標觀察各階段所誘導細胞停藥後的耐藥穩定性;採用實時熒光定量PCR(RT-qPCR)法檢測各階段所誘導細胞MDR-1 mRNA、多藥耐藥相關蛋白-1 (multidrug resistance-associated protein 1,MRP-1) mRNA的錶達量.結果 與親本細胞對照組比較,各階段所誘導S180細胞對化療藥物的耐藥倍數隨著誘導時間延長和劑量增高而逐漸增大,細胞內阿黴素(adriamycin,ADR)積纍量逐漸減少,細胞P-gp功能活性逐漸增彊;各階段所誘導S180細胞MDR-1mRNA、MRP-1 mRNA的錶達量也與誘導時間和給藥劑量呈正相關;第一、二和三階段所誘導細胞的穩定耐藥時間分彆為1週、2週和3週左右.結論 模擬臨床PFC化療方案給藥,採用分階段劑量遞增小鼠體內誘導法可建立耐藥彊度高、穩定時間長的穫得性S 180MDR實驗模型.
목적 소서체내유도건립획득성S180다약내약(multi-drug resistance,MDR)모형급기은정성관찰.방법 모의림상순박+불뇨밀정+배린선알(PFC)화료방안급약,분삼개계단제량체증법유도S180복수류소서,건립획득성S180MDR실험모형.채용새서람(MTT)법、류식세포술동태검측각계단소유도세포대화료약물적내약배수、세포내약물적루량급세포막P-당단백(P-glycoprotein,P-gp)공능활성,병통과검측이상지표관찰각계단소유도세포정약후적내약은정성;채용실시형광정량PCR(RT-qPCR)법검측각계단소유도세포MDR-1 mRNA、다약내약상관단백-1 (multidrug resistance-associated protein 1,MRP-1) mRNA적표체량.결과 여친본세포대조조비교,각계단소유도S180세포대화료약물적내약배수수착유도시간연장화제량증고이축점증대,세포내아매소(adriamycin,ADR)적루량축점감소,세포P-gp공능활성축점증강;각계단소유도S180세포MDR-1mRNA、MRP-1 mRNA적표체량야여유도시간화급약제량정정상관;제일、이화삼계단소유도세포적은정내약시간분별위1주、2주화3주좌우.결론 모의림상PFC화료방안급약,채용분계단제량체증소서체내유도법가건립내약강도고、은정시간장적획득성S 180MDR실험모형.
