首都医科大学学报
首都醫科大學學報
수도의과대학학보
Journal of Capital Medical University
2015年
5期
740-746
,共7页
杨俭%王勇%汪璇%杨兆菲%宫晓丽%王晓民
楊儉%王勇%汪璇%楊兆菲%宮曉麗%王曉民
양검%왕용%왕선%양조비%궁효려%왕효민
帕金森病%神经毒性%PINK1%DJ-1%DNA去甲基化酶TET1
帕金森病%神經毒性%PINK1%DJ-1%DNA去甲基化酶TET1
파금삼병%신경독성%PINK1%DJ-1%DNA거갑기화매TET1
Parkinson's disease%neurotoxicity%PINK1%DJ-1%Ten-eleven translocation 1
目的 在细胞水平上探究神经毒素作用下,关键的帕金森(Parkinson's disease)致病基因PINK1和DJ-1的转录情况,并从表观遗传学角度对其机制进行初步探索.方法 本研究使用MN9D细胞系作为研究对象.通过台盼蓝活细胞计数的方法筛选神经毒素6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)和1-甲基-4-苯基嘧啶离子(1-methyl-4-phenylpyridinium,MPP+)的半数致死剂量.通过半定量RT-PCR方法检测DJ-1基因和PINK1基因转录情况.通过RT-PCR以及免疫细胞荧光染色方法检测DNA去甲基化酶TET1的转录表达情况.结果 1)MN9D活细胞数在6-OHDA和MPP+作用下均发生了时间、剂量依赖性降低,6-OHDA和MPP+的半数致死剂量分别约为10 μmol/L和100 μmol/L.2)J-1的mRNA水平在6-OHDA或MPP+作用下未发生改变,而PINK1的mRNA水平则发生了明显的时间依赖下降.3)DNA去甲基化酶TET1的转录表达水平也发生显著下降.结论 神经毒素作用下,帕金森病致病基因PINK1的转录发生下调,并可能是由DNA去甲基化酶TET1表达下调所介导的.
目的 在細胞水平上探究神經毒素作用下,關鍵的帕金森(Parkinson's disease)緻病基因PINK1和DJ-1的轉錄情況,併從錶觀遺傳學角度對其機製進行初步探索.方法 本研究使用MN9D細胞繫作為研究對象.通過檯盼藍活細胞計數的方法篩選神經毒素6-羥基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)和1-甲基-4-苯基嘧啶離子(1-methyl-4-phenylpyridinium,MPP+)的半數緻死劑量.通過半定量RT-PCR方法檢測DJ-1基因和PINK1基因轉錄情況.通過RT-PCR以及免疫細胞熒光染色方法檢測DNA去甲基化酶TET1的轉錄錶達情況.結果 1)MN9D活細胞數在6-OHDA和MPP+作用下均髮生瞭時間、劑量依賴性降低,6-OHDA和MPP+的半數緻死劑量分彆約為10 μmol/L和100 μmol/L.2)J-1的mRNA水平在6-OHDA或MPP+作用下未髮生改變,而PINK1的mRNA水平則髮生瞭明顯的時間依賴下降.3)DNA去甲基化酶TET1的轉錄錶達水平也髮生顯著下降.結論 神經毒素作用下,帕金森病緻病基因PINK1的轉錄髮生下調,併可能是由DNA去甲基化酶TET1錶達下調所介導的.
목적 재세포수평상탐구신경독소작용하,관건적파금삼(Parkinson's disease)치병기인PINK1화DJ-1적전록정황,병종표관유전학각도대기궤제진행초보탐색.방법 본연구사용MN9D세포계작위연구대상.통과태반람활세포계수적방법사선신경독소6-간기다파알(6-hydroxydopamine,6-OHDA)화1-갑기-4-분기밀정리자(1-methyl-4-phenylpyridinium,MPP+)적반수치사제량.통과반정량RT-PCR방법검측DJ-1기인화PINK1기인전록정황.통과RT-PCR이급면역세포형광염색방법검측DNA거갑기화매TET1적전록표체정황.결과 1)MN9D활세포수재6-OHDA화MPP+작용하균발생료시간、제량의뢰성강저,6-OHDA화MPP+적반수치사제량분별약위10 μmol/L화100 μmol/L.2)J-1적mRNA수평재6-OHDA혹MPP+작용하미발생개변,이PINK1적mRNA수평칙발생료명현적시간의뢰하강.3)DNA거갑기화매TET1적전록표체수평야발생현저하강.결론 신경독소작용하,파금삼병치병기인PINK1적전록발생하조,병가능시유DNA거갑기화매TET1표체하조소개도적.
