CAJ | 학술논문

目的采用大鼠大脑中动脉梗死(middle cerebral artery occlusion, MCAO)再灌注模型,研究缺血脑组织再灌注后活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)的时程变化,探讨ROS在脑缺血损伤中的作用.方法采用数字表法将25只健康雄性SD大鼠随机分为5组:假手术(Sham)组,MCAO组(缺血90 min,再灌注3、6、12、24 h),每组5只大鼠.使用线栓法制作大鼠缺血90 min再灌注模型,术中监测大鼠平均动脉压及肛温,使其保持在正常范围.每组大鼠分别于再灌注后3、6、12、24h时处死,迅速取脑组织进行TTC染色,检测大鼠脑梗死体积,并制作新鲜脑组织冰冻切片,采用ROS特异性染色方法——H2DCF-DA荧光染色法,检测再灌注后不同时间点缺血半暗带区ROS的表达.结果 1)在MCAO手术过程中,Sham组以及MCAO组大鼠的平均动脉压及肛温差异无统计学意义.2)Sham组大鼠脑内无缺血半暗带区,其相应脑区内只可见极少量的H2DCF-DA阳性染色细胞.而MCAO组大鼠再灌注后3,6,12,24 h4个时间点,脑组织半暗带区域均可见大量的H2DCF-DA阳性染色细胞.且从再灌注3h起,MCAO组大鼠脑组织半暗带区域H2DCF-DA阳性染色细胞数量持续增加,其中再灌注6h与3h相比,差异有统计学意义(P＜0.05),再灌注24h与12h相比,差异有统计学意义(P＜0.05).3)TTC染色结果显示,Sham组大鼠无脑梗死发生.MCAO组大鼠脑组织随再灌注时间的延长(从3h到24 h),相对梗死体积逐渐增大,差异有统计学意义(P＜0.05).4) MCAO组大鼠脑组织H2DCF-DA阳性细胞数目与脑梗死体积比率呈正相关(r=0.833,P＜0.01).结论局灶性脑缺血模型大鼠再灌注后缺血侧脑组织中ROS量随再灌注时间延长递增,ROS在脑缺血再灌注损伤中具有重要作用.
목적 채용대서대뇌중동맥경사(middle cerebral artery occlusion, MCAO)재관주모형,연구결혈뇌조직재관주후활성양자유기(reactive oxygen species,ROS)적시정변화,탐토ROS재뇌결혈손상중적작용.방법 채용수자표법장25지건강웅성SD대서수궤분위5조:가수술(Sham)조,MCAO조(결혈90 min,재관주3、6、12、24 h),매조5지대서.사용선전법제작대서결혈90 min재관주모형,술중감측대서평균동맥압급항온,사기보지재정상범위.매조대서분별우재관주후3、6、12、24h시처사,신속취뇌조직진행TTC염색,검측대서뇌경사체적,병제작신선뇌조직빙동절편,채용ROS특이성염색방법——H2DCF-DA형광염색법,검측재관주후불동시간점결혈반암대구ROS적표체.결과 1)재MCAO수술과정중,Sham조이급MCAO조대서적평균동맥압급항온차이무통계학의의.2)Sham조대서뇌내무결혈반암대구,기상응뇌구내지가견겁소량적H2DCF-DA양성염색세포.이MCAO조대서재관주후3,6,12,24 h4개시간점,뇌조직반암대구역균가견대량적H2DCF-DA양성염색세포.차종재관주3h기,MCAO조대서뇌조직반암대구역H2DCF-DA양성염색세포수량지속증가,기중재관주6h여3h상비,차이유통계학의의(P＜0.05),재관주24h여12h상비,차이유통계학의의(P＜0.05).3)TTC염색결과현시,Sham조대서무뇌경사발생.MCAO조대서뇌조직수재관주시간적연장(종3h도24 h),상대경사체적축점증대,차이유통계학의의(P＜0.05).4) MCAO조대서뇌조직H2DCF-DA양성세포수목여뇌경사체적비솔정정상관(r=0.833,P＜0.01).결론 국조성뇌결혈모형대서재관주후결혈측뇌조직중ROS량수재관주시간연장체증,ROS재뇌결혈재관주손상중구유중요작용.