岭南现代临床外科
嶺南現代臨床外科
령남현대림상외과
Lingnan Modern Clinics in Surgery
2015年
5期
533-537
,共5页
吴文睿%孙红%余先焕%张锐%施祥德%朱满生%许磊波%吴卓
吳文睿%孫紅%餘先煥%張銳%施祥德%硃滿生%許磊波%吳卓
오문예%손홍%여선환%장예%시상덕%주만생%허뢰파%오탁
microRNA%肝癌%Bmi1%miR-200b
microRNA%肝癌%Bmi1%miR-200b
microRNA%간암%Bmi1%miR-200b
目的 研究miR-200b在肝癌中对Bmi1的调控作用,并分析其结合位点.方法 首先利用生物信息学软件预测人Bmi1 3'-UTR上miR-200b可能的结合位点;然后构建Bmi1 3'-UTR野生型和突变型报告载体,应用双荧光素酶报告基因分析检测Bmi1 3'-UTR上miR-200b的结合位点;最后利用real time PCR和Western blot在人肝癌细胞HepG2中验证miR-200b对Bmi1的调控作用.结果 人Bmi1 3'-UTR上存在3个miR-200b的潜在结合位点;双荧光素酶报告基因分析提示,转染miR-200b-3p mimic后野生型组荧光素酶活性明显低于突变型组;real time PCR和Western blot结果提示在HepG2细胞中过表达miR-200b可明显下调Bmi1的表达.结论 miR200b在肝癌中可通过靶向结合Bmi1基因3'-UTR特异性调控Bmi1基因的表达.
目的 研究miR-200b在肝癌中對Bmi1的調控作用,併分析其結閤位點.方法 首先利用生物信息學軟件預測人Bmi1 3'-UTR上miR-200b可能的結閤位點;然後構建Bmi1 3'-UTR野生型和突變型報告載體,應用雙熒光素酶報告基因分析檢測Bmi1 3'-UTR上miR-200b的結閤位點;最後利用real time PCR和Western blot在人肝癌細胞HepG2中驗證miR-200b對Bmi1的調控作用.結果 人Bmi1 3'-UTR上存在3箇miR-200b的潛在結閤位點;雙熒光素酶報告基因分析提示,轉染miR-200b-3p mimic後野生型組熒光素酶活性明顯低于突變型組;real time PCR和Western blot結果提示在HepG2細胞中過錶達miR-200b可明顯下調Bmi1的錶達.結論 miR200b在肝癌中可通過靶嚮結閤Bmi1基因3'-UTR特異性調控Bmi1基因的錶達.
목적 연구miR-200b재간암중대Bmi1적조공작용,병분석기결합위점.방법 수선이용생물신식학연건예측인Bmi1 3'-UTR상miR-200b가능적결합위점;연후구건Bmi1 3'-UTR야생형화돌변형보고재체,응용쌍형광소매보고기인분석검측Bmi1 3'-UTR상miR-200b적결합위점;최후이용real time PCR화Western blot재인간암세포HepG2중험증miR-200b대Bmi1적조공작용.결과 인Bmi1 3'-UTR상존재3개miR-200b적잠재결합위점;쌍형광소매보고기인분석제시,전염miR-200b-3p mimic후야생형조형광소매활성명현저우돌변형조;real time PCR화Western blot결과제시재HepG2세포중과표체miR-200b가명현하조Bmi1적표체.결론 miR200b재간암중가통과파향결합Bmi1기인3'-UTR특이성조공Bmi1기인적표체.
