华南农业大学学报
華南農業大學學報
화남농업대학학보
Journal of South China Agricultural University
2015年
6期
87-90
,共4页
赵蕊%吕利华%陈婷%何自福%何余容
趙蕊%呂利華%陳婷%何自福%何餘容
조예%려리화%진정%하자복%하여용
木尔坦棉花曲叶病毒%锦葵科%SYBR Green Ⅰ%实时荧光定量PCR%检测方法
木爾坦棉花麯葉病毒%錦葵科%SYBR Green Ⅰ%實時熒光定量PCR%檢測方法
목이탄면화곡협병독%금규과%SYBR Green Ⅰ%실시형광정량PCR%검측방법
CLCuMV%Malvaceae%SYBR Green Ⅰ%real-time fluorescence quantitative PCR%detection method
[目的]木尔坦棉花曲叶病毒Cotton Leaf Curl Multan Virus(CLCuMV)是为害锦葵科植物的重要双生病毒之一,本研究的目的是建立CLCuMV定量检测方法,为进一步研究其在寄主植物内的增殖动态、在介体昆虫内循环和其与寄主、介体间互作机制提供技术手段.[方法]以纯化的含CLCuMV基因组的质粒为模板,利用SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR对不同浓度的质粒样品进行CLCuMV扩增,制作标准曲线.依照建立的标准曲线,计算烟粉虱Bemisia tabaci及朱槿Hibiscus rosa-sinensis中CLCuMV的含量.[结果和结论]该定量检测法可检测到低浓度(5.2 × 101μL-1)的CLCuMV,其灵敏度是常规PCR的10倍,可被用于在寄主植物和介体昆虫体内CLCuMV的定量检测.
[目的]木爾坦棉花麯葉病毒Cotton Leaf Curl Multan Virus(CLCuMV)是為害錦葵科植物的重要雙生病毒之一,本研究的目的是建立CLCuMV定量檢測方法,為進一步研究其在寄主植物內的增殖動態、在介體昆蟲內循環和其與寄主、介體間互作機製提供技術手段.[方法]以純化的含CLCuMV基因組的質粒為模闆,利用SYBR Green Ⅰ熒光定量PCR對不同濃度的質粒樣品進行CLCuMV擴增,製作標準麯線.依照建立的標準麯線,計算煙粉虱Bemisia tabaci及硃槿Hibiscus rosa-sinensis中CLCuMV的含量.[結果和結論]該定量檢測法可檢測到低濃度(5.2 × 101μL-1)的CLCuMV,其靈敏度是常規PCR的10倍,可被用于在寄主植物和介體昆蟲體內CLCuMV的定量檢測.
[목적]목이탄면화곡협병독Cotton Leaf Curl Multan Virus(CLCuMV)시위해금규과식물적중요쌍생병독지일,본연구적목적시건립CLCuMV정량검측방법,위진일보연구기재기주식물내적증식동태、재개체곤충내순배화기여기주、개체간호작궤제제공기술수단.[방법]이순화적함CLCuMV기인조적질립위모판,이용SYBR Green Ⅰ형광정량PCR대불동농도적질립양품진행CLCuMV확증,제작표준곡선.의조건립적표준곡선,계산연분슬Bemisia tabaci급주근Hibiscus rosa-sinensis중CLCuMV적함량.[결과화결론]해정량검측법가검측도저농도(5.2 × 101μL-1)적CLCuMV,기령민도시상규PCR적10배,가피용우재기주식물화개체곤충체내CLCuMV적정량검측.