实用预防医学
實用預防醫學
실용예방의학
Practical Preventive Medicine
2015年
12期
1445-1448
,共4页
陈沙彬%梅建华%雷永良%刘敏
陳沙彬%梅建華%雷永良%劉敏
진사빈%매건화%뢰영량%류민
乙型脑炎病毒%E蛋白%胶体金
乙型腦炎病毒%E蛋白%膠體金
을형뇌염병독%E단백%효체금
Japanese encephalitis virus%E protein%Colloidal gold
目的 分离乙脑病毒临床株,制备高纯度E蛋白抗原,制作用于乙脑病毒抗体检测的胶体金快速检测试纸条.方法 PCR扩增乙脑病毒E蛋白基因、使用原核表达系统进行融合表达、Ni-柱亲和纯化,透析复性后多点皮下免疫动物获得兔抗乙脑病毒E蛋白的多克隆抗体,免疫印迹法检测该抗体与重组蛋白结合的特异性.对抗体处理后,制备快速检测乙脑病毒的胶体金试剂. 结果 成功克隆出乙脑病毒E蛋白基因并表达该蛋白,纯化后免疫印迹显示在蛋白分子量53 kDa左右显出1条目的条带(乙脑病毒E蛋白);酶联免疫法检测多克隆抗血清的效价达到1:12 800,与阴性血清不发生特异性反应. 结论 成功对乙脑病毒E蛋白基因进行了克隆表达,制备的胶体金试剂能检测出乙脑患者血清中的抗体,操作简便快速,具有临床推广意义.
目的 分離乙腦病毒臨床株,製備高純度E蛋白抗原,製作用于乙腦病毒抗體檢測的膠體金快速檢測試紙條.方法 PCR擴增乙腦病毒E蛋白基因、使用原覈錶達繫統進行融閤錶達、Ni-柱親和純化,透析複性後多點皮下免疫動物穫得兔抗乙腦病毒E蛋白的多剋隆抗體,免疫印跡法檢測該抗體與重組蛋白結閤的特異性.對抗體處理後,製備快速檢測乙腦病毒的膠體金試劑. 結果 成功剋隆齣乙腦病毒E蛋白基因併錶達該蛋白,純化後免疫印跡顯示在蛋白分子量53 kDa左右顯齣1條目的條帶(乙腦病毒E蛋白);酶聯免疫法檢測多剋隆抗血清的效價達到1:12 800,與陰性血清不髮生特異性反應. 結論 成功對乙腦病毒E蛋白基因進行瞭剋隆錶達,製備的膠體金試劑能檢測齣乙腦患者血清中的抗體,操作簡便快速,具有臨床推廣意義.
목적 분리을뇌병독림상주,제비고순도E단백항원,제작용우을뇌병독항체검측적효체금쾌속검측시지조.방법 PCR확증을뇌병독E단백기인、사용원핵표체계통진행융합표체、Ni-주친화순화,투석복성후다점피하면역동물획득토항을뇌병독E단백적다극륭항체,면역인적법검측해항체여중조단백결합적특이성.대항체처리후,제비쾌속검측을뇌병독적효체금시제. 결과 성공극륭출을뇌병독E단백기인병표체해단백,순화후면역인적현시재단백분자량53 kDa좌우현출1조목적조대(을뇌병독E단백);매련면역법검측다극륭항혈청적효개체도1:12 800,여음성혈청불발생특이성반응. 결론 성공대을뇌병독E단백기인진행료극륭표체,제비적효체금시제능검측출을뇌환자혈청중적항체,조작간편쾌속,구유림상추엄의의.
