黑龙江八一农垦大学学报
黑龍江八一農墾大學學報
흑룡강팔일농은대학학보
Journal of Heilongjiang August First Land Reclamation University
2015年
6期
28-32
,共5页
毕艳铎%魏晓曼%冉旭华%曹思%张峣%张玲玲%苗艳%闻晓波
畢豔鐸%魏曉曼%冉旭華%曹思%張峣%張玲玲%苗豔%聞曉波
필염탁%위효만%염욱화%조사%장요%장령령%묘염%문효파
猪轮状病毒%△VP8*蛋白%Gottfried株%原核表达
豬輪狀病毒%△VP8*蛋白%Gottfried株%原覈錶達
저륜상병독%△VP8*단백%Gottfried주%원핵표체
为了分析原核表达的猪轮状病毒(PRV) Gottfried株截短的VP8*(△VP8* aa 64-223)重组蛋白的免疫原性,通过构建原核表达载体pET-28a-Gottfried-△VP8*(aa 64-223),转化大肠杆菌BL21 (DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达、经SDS-PAGE和Western blotting检测,并纯化后,肌肉免疫Balb/c小鼠,证明重组蛋白相对分子质量约25.0 kDa,以包涵体和可溶性两种形式存在,纯化的重组蛋白纯度在95％以上,可溶性蛋白产量可达14～15 mg·L-1.ELISA方法检测表明该重组蛋白可以诱导高滴度的特异性抗体,证明其具有良好的免疫原性,为进一步研制PRV亚单位疫苗及建立ELISA诊断方法奠定基础.
為瞭分析原覈錶達的豬輪狀病毒(PRV) Gottfried株截短的VP8*(△VP8* aa 64-223)重組蛋白的免疫原性,通過構建原覈錶達載體pET-28a-Gottfried-△VP8*(aa 64-223),轉化大腸桿菌BL21 (DE3)感受態細胞,IPTG誘導錶達、經SDS-PAGE和Western blotting檢測,併純化後,肌肉免疫Balb/c小鼠,證明重組蛋白相對分子質量約25.0 kDa,以包涵體和可溶性兩種形式存在,純化的重組蛋白純度在95％以上,可溶性蛋白產量可達14～15 mg·L-1.ELISA方法檢測錶明該重組蛋白可以誘導高滴度的特異性抗體,證明其具有良好的免疫原性,為進一步研製PRV亞單位疫苗及建立ELISA診斷方法奠定基礎.
위료분석원핵표체적저륜상병독(PRV) Gottfried주절단적VP8*(△VP8* aa 64-223)중조단백적면역원성,통과구건원핵표체재체pET-28a-Gottfried-△VP8*(aa 64-223),전화대장간균BL21 (DE3)감수태세포,IPTG유도표체、경SDS-PAGE화Western blotting검측,병순화후,기육면역Balb/c소서,증명중조단백상대분자질량약25.0 kDa,이포함체화가용성량충형식존재,순화적중조단백순도재95％이상,가용성단백산량가체14～15 mg·L-1.ELISA방법검측표명해중조단백가이유도고적도적특이성항체,증명기구유량호적면역원성,위진일보연제PRV아단위역묘급건립ELISA진단방법전정기출.
