CAJ | 학술논문

基于核酸外切酶Ⅲ(ExoⅢ)辅助分析物循环放大原理,结合石墨烯(G)的超高荧光猝灭能力,以三磷酸腺苷(ATP)作为模型分析物,构建了一种新型的荧光探针,实现了ATP的高灵敏检测.两条DNA链各包含一部分ATP适体序列,其中1条DNA链的3'端修饰有荧光染料异硫氰酸荧光素(HTC).当模型分析物不存在时,两条DNA链通过非共价π-π堆积作用吸附在G表面,导致FITC的荧光猝灭.当目标物ATP存在时,两条DNA链与目标物ATP进行特异性结合,形成一双链夹心结构,随后加入ExoⅢ,由于ExoⅢ可对该双链夹心结构的3'凹陷末端进行逐步水解,释放出目标物ATP和游离的FITC.释放出的目标物ATP可继续进入下一循环,不断产生游离FITC,游离FITC将脱离G表面,从而导致体系的荧光恢复,并且恢复的荧光强度与ATP浓度在0.02 ～1 μmol/L范围内存在良好的线性关系,检出限(S/N =3)为9 nmol/L.
기우핵산외절매Ⅲ(ExoⅢ)보조분석물순배방대원리,결합석묵희(G)적초고형광졸멸능력,이삼린산선감(ATP)작위모형분석물,구건료일충신형적형광탐침,실현료ATP적고령민검측.량조DNA련각포함일부분ATP괄체서렬,기중1조DNA련적3'단수식유형광염료이류청산형광소(HTC).당모형분석물불존재시,량조DNA련통과비공개π-π퇴적작용흡부재G표면,도치FITC적형광졸멸.당목표물ATP존재시,량조DNA련여목표물ATP진행특이성결합,형성일쌍련협심결구,수후가입ExoⅢ,유우ExoⅢ가대해쌍련협심결구적3'요함말단진행축보수해,석방출목표물ATP화유리적FITC.석방출적목표물ATP가계속진입하일순배,불단산생유리FITC,유리FITC장탈리G표면,종이도치체계적형광회복,병차회복적형광강도여ATP농도재0.02 ～1 μmol/L범위내존재량호적선성관계,검출한(S/N =3)위9 nmol/L.