华北农学报
華北農學報
화북농학보
Acta Agriculturae Boreali-Sinica
2015年
5期
108-114
,共7页
包春光%黄凤兰%朱国立%刘浩%杜娟%彭木%陈晓凤%赵永
包春光%黃鳳蘭%硃國立%劉浩%杜娟%彭木%陳曉鳳%趙永
포춘광%황봉란%주국립%류호%두연%팽목%진효봉%조영
蓖麻%种子%大小%RAPD
蓖痳%種子%大小%RAPD
비마%충자%대소%RAPD
Castor%Seed%Size%RAPD
蓖麻种子大小因品种不同差异很大,目前尚未见与蓖麻种子大小性状发育相关的分子生物学研究.以32个不同大小的蓖麻种子作为研究材料,用U25(55)均匀试验设计法对种子大小性状的RAPD-PCR反应体系和条件进行优化.最佳反应体系为:25μL体系中10×Buffer 2.7 μL、dNTP 2.4 μL、Mg2+ 2.4 μL、DNA 1.7μL、引物1.9 μL、Taq polymerase 2.0 μL、ddH2O 11.9 μL.最佳反应条件为:94℃150 s;94℃45 s,39℃65 s,72℃90 s,35个循环;72℃10 min;4℃保存.用SB-002引物(碱基序列(5'-3'):TGCCGAGCTG),采用最佳的反应体系和条件在最大粒蓖麻种子中筛选到一个差异条带,测序结果在NCBI中进行比对,发现与高产粳稻基因组DNA、mRNA或cDNA同源性达到100％,因此推断所获差异条带与蓖麻种子产量有关,为蓖麻种子大小性状相关分子机理研究奠定了基础.
蓖痳種子大小因品種不同差異很大,目前尚未見與蓖痳種子大小性狀髮育相關的分子生物學研究.以32箇不同大小的蓖痳種子作為研究材料,用U25(55)均勻試驗設計法對種子大小性狀的RAPD-PCR反應體繫和條件進行優化.最佳反應體繫為:25μL體繫中10×Buffer 2.7 μL、dNTP 2.4 μL、Mg2+ 2.4 μL、DNA 1.7μL、引物1.9 μL、Taq polymerase 2.0 μL、ddH2O 11.9 μL.最佳反應條件為:94℃150 s;94℃45 s,39℃65 s,72℃90 s,35箇循環;72℃10 min;4℃保存.用SB-002引物(堿基序列(5'-3'):TGCCGAGCTG),採用最佳的反應體繫和條件在最大粒蓖痳種子中篩選到一箇差異條帶,測序結果在NCBI中進行比對,髮現與高產粳稻基因組DNA、mRNA或cDNA同源性達到100％,因此推斷所穫差異條帶與蓖痳種子產量有關,為蓖痳種子大小性狀相關分子機理研究奠定瞭基礎.
비마충자대소인품충불동차이흔대,목전상미견여비마충자대소성상발육상관적분자생물학연구.이32개불동대소적비마충자작위연구재료,용U25(55)균균시험설계법대충자대소성상적RAPD-PCR반응체계화조건진행우화.최가반응체계위:25μL체계중10×Buffer 2.7 μL、dNTP 2.4 μL、Mg2+ 2.4 μL、DNA 1.7μL、인물1.9 μL、Taq polymerase 2.0 μL、ddH2O 11.9 μL.최가반응조건위:94℃150 s;94℃45 s,39℃65 s,72℃90 s,35개순배;72℃10 min;4℃보존.용SB-002인물(감기서렬(5'-3'):TGCCGAGCTG),채용최가적반응체계화조건재최대립비마충자중사선도일개차이조대,측서결과재NCBI중진행비대,발현여고산갱도기인조DNA、mRNA혹cDNA동원성체도100％,인차추단소획차이조대여비마충자산량유관,위비마충자대소성상상관분자궤리연구전정료기출.
