南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
Journal of Southern Medical University
2015年
10期
1411-1416
,共6页
董昭兴%邰文琳%雷雯%王颖%李振坤%张涛
董昭興%邰文琳%雷雯%王穎%李振坤%張濤
동소흥%태문림%뢰문%왕영%리진곤%장도
白细胞介素27受体%增殖%转化%肺成纤维细胞%胶原合成
白細胞介素27受體%增殖%轉化%肺成纖維細胞%膠原閤成
백세포개소27수체%증식%전화%폐성섬유세포%효원합성
interleukin-27 receptor%proliferation%transformation%pulmonary fibroblast%collagen synthesis
目的 探讨IL-27及其受体(WSX-1)对TGF-β1诱导的小鼠肺成;纤维细胞增殖、转化及胶原合成作用.方法 构建IL-27R/pCDNA3.1过表达载体.实验分为6个组:正常组,TGF-β1组,IL-27组,IL-27受体组,IL-27+IL-27受体组,TGF-β1 +IL-27+IL-27受体组.光学显微镜下观察细胞的生长状况,用MTT检测各处理组对肺成纤维细胞增殖的影响.RT-PCR和Westernblotting检测肌成纤维细胞标志物a-SMA以及Ⅰ和Ⅲ型胶原的表达,并用免疫荧光检测a-SMA蛋白的定位及表达情况.结果 (1) IL-27和IL-27R都可以抑制肺成纤维细胞增殖;(2)TGF-β1促进肺成纤维细胞表达α-SMA增加,并促进肺成纤维细胞Ⅰ和Ⅲ型胶原合成;(3)IL-27及其受体可以抑制肺成纤维细胞α-SMA的表达,并减少肺成纤维细胞Ⅰ和Ⅲ型胶原的合成;(4)IL-27/IL-27R共同作用时,对肺成纤维细胞增殖转化没有影响.结论 IL-27或IL-27受体可以抑制TGF-β1诱导的小鼠肺纤维化细胞增殖、转化和胶原的合成作用,但是IL-27与IL-27受体共同存在的情况下却不能发挥抑制作用,这可能是由于外源性的IL-27与IL-27受体的中和作用不能激活细胞相关信号.
目的 探討IL-27及其受體(WSX-1)對TGF-β1誘導的小鼠肺成;纖維細胞增殖、轉化及膠原閤成作用.方法 構建IL-27R/pCDNA3.1過錶達載體.實驗分為6箇組:正常組,TGF-β1組,IL-27組,IL-27受體組,IL-27+IL-27受體組,TGF-β1 +IL-27+IL-27受體組.光學顯微鏡下觀察細胞的生長狀況,用MTT檢測各處理組對肺成纖維細胞增殖的影響.RT-PCR和Westernblotting檢測肌成纖維細胞標誌物a-SMA以及Ⅰ和Ⅲ型膠原的錶達,併用免疫熒光檢測a-SMA蛋白的定位及錶達情況.結果 (1) IL-27和IL-27R都可以抑製肺成纖維細胞增殖;(2)TGF-β1促進肺成纖維細胞錶達α-SMA增加,併促進肺成纖維細胞Ⅰ和Ⅲ型膠原閤成;(3)IL-27及其受體可以抑製肺成纖維細胞α-SMA的錶達,併減少肺成纖維細胞Ⅰ和Ⅲ型膠原的閤成;(4)IL-27/IL-27R共同作用時,對肺成纖維細胞增殖轉化沒有影響.結論 IL-27或IL-27受體可以抑製TGF-β1誘導的小鼠肺纖維化細胞增殖、轉化和膠原的閤成作用,但是IL-27與IL-27受體共同存在的情況下卻不能髮揮抑製作用,這可能是由于外源性的IL-27與IL-27受體的中和作用不能激活細胞相關信號.
목적 탐토IL-27급기수체(WSX-1)대TGF-β1유도적소서폐성;섬유세포증식、전화급효원합성작용.방법 구건IL-27R/pCDNA3.1과표체재체.실험분위6개조:정상조,TGF-β1조,IL-27조,IL-27수체조,IL-27+IL-27수체조,TGF-β1 +IL-27+IL-27수체조.광학현미경하관찰세포적생장상황,용MTT검측각처리조대폐성섬유세포증식적영향.RT-PCR화Westernblotting검측기성섬유세포표지물a-SMA이급Ⅰ화Ⅲ형효원적표체,병용면역형광검측a-SMA단백적정위급표체정황.결과 (1) IL-27화IL-27R도가이억제폐성섬유세포증식;(2)TGF-β1촉진폐성섬유세포표체α-SMA증가,병촉진폐성섬유세포Ⅰ화Ⅲ형효원합성;(3)IL-27급기수체가이억제폐성섬유세포α-SMA적표체,병감소폐성섬유세포Ⅰ화Ⅲ형효원적합성;(4)IL-27/IL-27R공동작용시,대폐성섬유세포증식전화몰유영향.결론 IL-27혹IL-27수체가이억제TGF-β1유도적소서폐섬유화세포증식、전화화효원적합성작용,단시IL-27여IL-27수체공동존재적정황하각불능발휘억제작용,저가능시유우외원성적IL-27여IL-27수체적중화작용불능격활세포상관신호.