华北农学报
華北農學報
화북농학보
Acta Agriculturae Boreali-Sinica
2015年
5期
92-96
,共5页
冯梦诗%叶俊%侯莉莉%李明%唐丁%张建祥%王为云%徐志豪%李亚飞
馮夢詩%葉俊%侯莉莉%李明%唐丁%張建祥%王為雲%徐誌豪%李亞飛
풍몽시%협준%후리리%리명%당정%장건상%왕위운%서지호%리아비
水稻%香味%OsBADH2基因%RNAi%无选择标记
水稻%香味%OsBADH2基因%RNAi%無選擇標記
수도%향미%OsBADH2기인%RNAi%무선택표기
Rice%Fragrant%OsBADH2%RNAi%Marker-free
香味是稻米食味品质的主要性状之一,为培育无抗性选择标记基因的优质香稻新品系,以携带有超双元载体OsBADH2-RNAi的农杆菌菌株EHA105介导,将OsBADH2基因的RNA干扰结构和潮霉素抗性选择标记(HPT)基因同时导入优质粳稻武育粳3号成熟胚来源的愈伤组织中,经过在含有潮霉素的培养基上筛选和分化,获得了54个独立转化子,其中36个转化子同时含目的基因和HPT基因,共转化频率为66.7％;从这些转化子的后代中共筛选获得25个去除HPT基因的转化子,去标记频率为69.4％;通过KOH法等4种方法进行香味的鉴定,获得15个具有香味的株系.实时定量PCR分析结果表明,具香味株系中的OsBADH2基因的表达受到了明显抑制,进一步证明了香味的产生是由于OsBADH2基因被干扰而引起.农艺性状调查表明,抑制OsBADH2基因的表达对水稻产量相关性状,包括株高、千粒质量、穗粒数和结实率影响不明显.
香味是稻米食味品質的主要性狀之一,為培育無抗性選擇標記基因的優質香稻新品繫,以攜帶有超雙元載體OsBADH2-RNAi的農桿菌菌株EHA105介導,將OsBADH2基因的RNA榦擾結構和潮黴素抗性選擇標記(HPT)基因同時導入優質粳稻武育粳3號成熟胚來源的愈傷組織中,經過在含有潮黴素的培養基上篩選和分化,穫得瞭54箇獨立轉化子,其中36箇轉化子同時含目的基因和HPT基因,共轉化頻率為66.7％;從這些轉化子的後代中共篩選穫得25箇去除HPT基因的轉化子,去標記頻率為69.4％;通過KOH法等4種方法進行香味的鑒定,穫得15箇具有香味的株繫.實時定量PCR分析結果錶明,具香味株繫中的OsBADH2基因的錶達受到瞭明顯抑製,進一步證明瞭香味的產生是由于OsBADH2基因被榦擾而引起.農藝性狀調查錶明,抑製OsBADH2基因的錶達對水稻產量相關性狀,包括株高、韆粒質量、穗粒數和結實率影響不明顯.
향미시도미식미품질적주요성상지일,위배육무항성선택표기기인적우질향도신품계,이휴대유초쌍원재체OsBADH2-RNAi적농간균균주EHA105개도,장OsBADH2기인적RNA간우결구화조매소항성선택표기(HPT)기인동시도입우질갱도무육갱3호성숙배래원적유상조직중,경과재함유조매소적배양기상사선화분화,획득료54개독립전화자,기중36개전화자동시함목적기인화HPT기인,공전화빈솔위66.7％;종저사전화자적후대중공사선획득25개거제HPT기인적전화자,거표기빈솔위69.4％;통과KOH법등4충방법진행향미적감정,획득15개구유향미적주계.실시정량PCR분석결과표명,구향미주계중적OsBADH2기인적표체수도료명현억제,진일보증명료향미적산생시유우OsBADH2기인피간우이인기.농예성상조사표명,억제OsBADH2기인적표체대수도산량상관성상,포괄주고、천립질량、수립수화결실솔영향불명현.
