南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
Journal of Southern Medical University
2015年
10期
1374-1379
,共6页
瞬时受体电位通道C1%Ca2+%气道重塑%基因沉默技术
瞬時受體電位通道C1%Ca2+%氣道重塑%基因沉默技術
순시수체전위통도C1%Ca2+%기도중소%기인침묵기술
Transient receptor potential canonical 1%Ca2+%airway remodeling%gene silencing technique
目的 通过干预瞬时受体电位通道C1(TRPC1)的表达,探讨TRPC1离子通道在气道重塑演变过程中的作用机制及布地奈德的干预作用.方法 雄性普通级豚鼠50只,随机均分为5组:A组为空白对照组、B组为卵蛋白刺激组、C组为卵蛋白刺激+TRPC1 siRNA干扰组、D组为卵蛋白刺激+荧光素酶siRNA干预组、E组为卵蛋白刺激+布地奈德干扰组.取肺泡灌洗液(BALF),比较嗜酸性粒细胞(Eos)占总细胞数的百分比;酶联免疫吸附法(ELISA)测定BALF中IL-5,IL-13表达水平.取支气管肺组织行苏木精-伊红染色(HE)、马松三色染色(Maason),Image-Pro图像处理软件定量分析支气管壁厚度、平滑肌增殖及胶原沉积情况.免疫组化法观察TRPC1蛋白在肺内相对表达水平.实时荧光定量PCR法测定TRPC1 mRNA的相对表达.结果 Image-Pro图像软件分析结果示,B组显著表现出支气管壁增厚、平滑肌增殖、基底膜胶原沉积、气道周围炎症细胞浸润、炎症因子增加等病理变化,C组、E组的上述病理变化则不明显(P<0.05).进一步行免疫组化法显示,TRPC1蛋白位于支气管上皮粘膜层,主要分布于支气管粘膜基底细胞、柱状上皮细胞的胞膜及胞核内.结论 TRPC1通道在哮喘个体的高水平表达与气道重塑、慢性气道炎症的发生、发展密切关联;而布地奈德可在一定程度上通过调节TRPC1的表达参与气道重塑的演变.
目的 通過榦預瞬時受體電位通道C1(TRPC1)的錶達,探討TRPC1離子通道在氣道重塑縯變過程中的作用機製及佈地奈德的榦預作用.方法 雄性普通級豚鼠50隻,隨機均分為5組:A組為空白對照組、B組為卵蛋白刺激組、C組為卵蛋白刺激+TRPC1 siRNA榦擾組、D組為卵蛋白刺激+熒光素酶siRNA榦預組、E組為卵蛋白刺激+佈地奈德榦擾組.取肺泡灌洗液(BALF),比較嗜痠性粒細胞(Eos)佔總細胞數的百分比;酶聯免疫吸附法(ELISA)測定BALF中IL-5,IL-13錶達水平.取支氣管肺組織行囌木精-伊紅染色(HE)、馬鬆三色染色(Maason),Image-Pro圖像處理軟件定量分析支氣管壁厚度、平滑肌增殖及膠原沉積情況.免疫組化法觀察TRPC1蛋白在肺內相對錶達水平.實時熒光定量PCR法測定TRPC1 mRNA的相對錶達.結果 Image-Pro圖像軟件分析結果示,B組顯著錶現齣支氣管壁增厚、平滑肌增殖、基底膜膠原沉積、氣道週圍炎癥細胞浸潤、炎癥因子增加等病理變化,C組、E組的上述病理變化則不明顯(P<0.05).進一步行免疫組化法顯示,TRPC1蛋白位于支氣管上皮粘膜層,主要分佈于支氣管粘膜基底細胞、柱狀上皮細胞的胞膜及胞覈內.結論 TRPC1通道在哮喘箇體的高水平錶達與氣道重塑、慢性氣道炎癥的髮生、髮展密切關聯;而佈地奈德可在一定程度上通過調節TRPC1的錶達參與氣道重塑的縯變.
목적 통과간예순시수체전위통도C1(TRPC1)적표체,탐토TRPC1리자통도재기도중소연변과정중적작용궤제급포지내덕적간예작용.방법 웅성보통급돈서50지,수궤균분위5조:A조위공백대조조、B조위란단백자격조、C조위란단백자격+TRPC1 siRNA간우조、D조위란단백자격+형광소매siRNA간예조、E조위란단백자격+포지내덕간우조.취폐포관세액(BALF),비교기산성립세포(Eos)점총세포수적백분비;매련면역흡부법(ELISA)측정BALF중IL-5,IL-13표체수평.취지기관폐조직행소목정-이홍염색(HE)、마송삼색염색(Maason),Image-Pro도상처리연건정량분석지기관벽후도、평활기증식급효원침적정황.면역조화법관찰TRPC1단백재폐내상대표체수평.실시형광정량PCR법측정TRPC1 mRNA적상대표체.결과 Image-Pro도상연건분석결과시,B조현저표현출지기관벽증후、평활기증식、기저막효원침적、기도주위염증세포침윤、염증인자증가등병리변화,C조、E조적상술병리변화칙불명현(P<0.05).진일보행면역조화법현시,TRPC1단백위우지기관상피점막층,주요분포우지기관점막기저세포、주상상피세포적포막급포핵내.결론 TRPC1통도재효천개체적고수평표체여기도중소、만성기도염증적발생、발전밀절관련;이포지내덕가재일정정도상통과조절TRPC1적표체삼여기도중소적연변.