基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
Basic & Clinical Medicine
2015年
3期
295-302
,共8页
於绍龙%刘丹平%赵辉%齐鑫%张解元%李谌
於紹龍%劉丹平%趙輝%齊鑫%張解元%李諶
어소룡%류단평%조휘%제흠%장해원%리심
突变型低氧诱导因子1α%内皮祖细胞%骨形态形成蛋白2%骨髓基质细胞%成骨%成血管
突變型低氧誘導因子1α%內皮祖細胞%骨形態形成蛋白2%骨髓基質細胞%成骨%成血管
돌변형저양유도인자1α%내피조세포%골형태형성단백2%골수기질세포%성골%성혈관
mutant hypoxia inducible factor1α%endothelial progenitor cells%morphogenetic protein 2%bone marrow stromal cells%osteogenesis%angiogenesis
目的 研究表达突变型低氧诱导因子1α的内皮祖细胞(EPCs)对骨形态形成蛋白2(BMP2)转染的骨髓基质细胞(BMSCs)成骨及成血管的影响.方法 密度梯度离心法分离培养兔BMSCs和EPCs并鉴定,MTT法检测不同比例BMSCs/EPCs混合培养时增殖作用,以确定混合细胞比例.实验分为6组:A组(BMSCs);B组(Adv-BMP-2BMSCs);C组(BMSCs+ EPCs);D组(Adv-BMP-2 BMSCs+EPCs);E组(BMSCs+ Adv-HIF1αu-EPCs);F组(Adv-BMP-2 BMSCs+ Adv-HIF1αmu-EPCs).以Adv-HIF1αmu和Adv-BMP2的最佳转染指数(MOI)分别转染EPCs和BMSCs.Western blot检测HIF-1α和BMP-2蛋白表达.行碱性磷酸酶活性检测;用qRT-PCR检测相关基因的表达,以评价共培养细胞成骨和成血管情况.结果 BMSCs与EPCs以1:1混合培养增殖能力优于1:2及2:1,故该实验混合细胞比例确定为1:1.Adv-BMP-2 BMSCs和BMSCs组可见BMP-2蛋白表达且表达量高于EPCs和Adv-HIF1αmu-EPCs组(P＜0.05).Adv-HIF1 αmu-EPCs组可见HIF1α蛋白表达且表达量明显高于Adv-BMP-2 BMSCs、BMSCs及EPCs组(P＜0.05).F组ALP活性以及成骨和成血管相关基因表达高于其他组(P＜0.05).结论 表达HIF1 αmu的EPCs能够增强Adv-BMP-2 BMSCs成骨和成血管潜能.
目的 研究錶達突變型低氧誘導因子1α的內皮祖細胞(EPCs)對骨形態形成蛋白2(BMP2)轉染的骨髓基質細胞(BMSCs)成骨及成血管的影響.方法 密度梯度離心法分離培養兔BMSCs和EPCs併鑒定,MTT法檢測不同比例BMSCs/EPCs混閤培養時增殖作用,以確定混閤細胞比例.實驗分為6組:A組(BMSCs);B組(Adv-BMP-2BMSCs);C組(BMSCs+ EPCs);D組(Adv-BMP-2 BMSCs+EPCs);E組(BMSCs+ Adv-HIF1αu-EPCs);F組(Adv-BMP-2 BMSCs+ Adv-HIF1αmu-EPCs).以Adv-HIF1αmu和Adv-BMP2的最佳轉染指數(MOI)分彆轉染EPCs和BMSCs.Western blot檢測HIF-1α和BMP-2蛋白錶達.行堿性燐痠酶活性檢測;用qRT-PCR檢測相關基因的錶達,以評價共培養細胞成骨和成血管情況.結果 BMSCs與EPCs以1:1混閤培養增殖能力優于1:2及2:1,故該實驗混閤細胞比例確定為1:1.Adv-BMP-2 BMSCs和BMSCs組可見BMP-2蛋白錶達且錶達量高于EPCs和Adv-HIF1αmu-EPCs組(P＜0.05).Adv-HIF1 αmu-EPCs組可見HIF1α蛋白錶達且錶達量明顯高于Adv-BMP-2 BMSCs、BMSCs及EPCs組(P＜0.05).F組ALP活性以及成骨和成血管相關基因錶達高于其他組(P＜0.05).結論 錶達HIF1 αmu的EPCs能夠增彊Adv-BMP-2 BMSCs成骨和成血管潛能.
목적 연구표체돌변형저양유도인자1α적내피조세포(EPCs)대골형태형성단백2(BMP2)전염적골수기질세포(BMSCs)성골급성혈관적영향.방법 밀도제도리심법분리배양토BMSCs화EPCs병감정,MTT법검측불동비례BMSCs/EPCs혼합배양시증식작용,이학정혼합세포비례.실험분위6조:A조(BMSCs);B조(Adv-BMP-2BMSCs);C조(BMSCs+ EPCs);D조(Adv-BMP-2 BMSCs+EPCs);E조(BMSCs+ Adv-HIF1αu-EPCs);F조(Adv-BMP-2 BMSCs+ Adv-HIF1αmu-EPCs).이Adv-HIF1αmu화Adv-BMP2적최가전염지수(MOI)분별전염EPCs화BMSCs.Western blot검측HIF-1α화BMP-2단백표체.행감성린산매활성검측;용qRT-PCR검측상관기인적표체,이평개공배양세포성골화성혈관정황.결과 BMSCs여EPCs이1:1혼합배양증식능력우우1:2급2:1,고해실험혼합세포비례학정위1:1.Adv-BMP-2 BMSCs화BMSCs조가견BMP-2단백표체차표체량고우EPCs화Adv-HIF1αmu-EPCs조(P＜0.05).Adv-HIF1 αmu-EPCs조가견HIF1α단백표체차표체량명현고우Adv-BMP-2 BMSCs、BMSCs급EPCs조(P＜0.05).F조ALP활성이급성골화성혈관상관기인표체고우기타조(P＜0.05).결론 표체HIF1 αmu적EPCs능구증강Adv-BMP-2 BMSCs성골화성혈관잠능.
