CAJ | 학술논문

[目的]利用高通量、快速、灵敏的实时荧光定量PCR法,检测转类胰岛素样生长因子1-红色荧光蛋白基因(insulin-like growth factor 1-red fluorescent protein,IGF1-RFP)绵羊中外源基因的拷贝数.[方法]以甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)作为绵羊的内源参照基因,梯度稀释法.[结果]分别获得RFP和GAPDH基因的Q值与起始模板数的相关性标准曲线,R2分别为0.999和0.999,相关性高.通过比较目的基因RFP和GAPDH起始模板数,得到外源基因在转基因绵羊中的拷贝数.编号0152、0216、0217、0218的转基因绵羊拷贝数分别为3、1、1、1.[结论]以IGF-Ⅰ转基因细毛羊为研究对象,针对外源基因序列和内源参照基因序列设计特异性引物,利用实时荧光定量PCR法对IGF-Ⅰ转基因细毛羊外源基因的拷贝数进行检测,并且准确检测外源基因的拷贝数.
[목적]이용고통량、쾌속、령민적실시형광정량PCR법,검측전류이도소양생장인자1-홍색형광단백기인(insulin-like growth factor 1-red fluorescent protein,IGF1-RFP)면양중외원기인적고패수.[방법]이감유철-3-린산탈경매(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)작위면양적내원삼조기인,제도희석법.[결과]분별획득RFP화GAPDH기인적Q치여기시모판수적상관성표준곡선,R2분별위0.999화0.999,상관성고.통과비교목적기인RFP화GAPDH기시모판수,득도외원기인재전기인면양중적고패수.편호0152、0216、0217、0218적전기인면양고패수분별위3、1、1、1.[결론]이IGF-Ⅰ전기인세모양위연구대상,침대외원기인서렬화내원삼조기인서렬설계특이성인물,이용실시형광정량PCR법대IGF-Ⅰ전기인세모양외원기인적고패수진행검측,병차준학검측외원기인적고패수.