CAJ | 학술논문

目的:建立稳定的人脐血间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)分离培养体系,观察其移植对脑瘫(CP)大鼠功能恢复的影响及细胞的存活、迁移、向神经细胞分化的情况,并与神经节苷脂(GM1)注射对CP鼠神经功能恢复进行对比.方法:采集足月新生儿脐带血100ml,分离出单个核细胞,体外培养并予5-溴脱氧嘧啶尿苷(Brdu)标记72h;受孕17d孕鼠腹腔注射脂多糖(LPS)0.4mg/(kg·d),12h后置于缺氧环境2～2.5h,4h后再次腹腔注射同剂量LPS,孕鼠自体分娩,生后4周,通过行为学评分选择CP模型动物80只,随机分为4组:CP组(CP模型)、假移植组(CP模型+PBS)、MSCs移植组(CP模型+MSCs)、GM1注射组(CP模型+GM1),每组20只.移植后第1、2、3周应用免疫荧光法观察Brdu标记的MSCs的存活、迁移,移植后第4周,通过行为学评价观察大鼠神经功能恢复情况,应用免疫荧光法检测其胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达情况.结果:MSCs移植比GM1注射使大鼠握持时间更长,足错误次数更少(P＜0.05);移植的MSCs可在大鼠脑组织中存活,并向四周脑组织迁移,(0.45±0.68)个MSCs表达GFAP,(0.15±0.36)个MSCs表达NSE.结论:人脐血MSCs移植比神经节苷脂注射较好的提高CP大鼠神经功能的恢复,移植细胞可在大鼠脑缺血区域中存活、迁移,并部分向星形胶质细胞或神经元分化.
목적:건립은정적인제혈간충질간세포(mesenchymal stem cells,MSCs)분리배양체계,관찰기이식대뇌탄(CP)대서공능회복적영향급세포적존활、천이、향신경세포분화적정황,병여신경절감지(GM1)주사대CP서신경공능회복진행대비.방법:채집족월신생인제대혈100ml,분리출단개핵세포,체외배양병여5-추탈양밀정뇨감(Brdu)표기72h;수잉17d잉서복강주사지다당(LPS)0.4mg/(kg·d),12h후치우결양배경2～2.5h,4h후재차복강주사동제량LPS,잉서자체분면,생후4주,통과행위학평분선택CP모형동물80지,수궤분위4조:CP조(CP모형)、가이식조(CP모형+PBS)、MSCs이식조(CP모형+MSCs)、GM1주사조(CP모형+GM1),매조20지.이식후제1、2、3주응용면역형광법관찰Brdu표기적MSCs적존활、천이,이식후제4주,통과행위학평개관찰대서신경공능회복정황,응용면역형광법검측기효질섬유산성단백(GFAP)화신경원특이성희순화매(NSE)적표체정황.결과:MSCs이식비GM1주사사대서악지시간경장,족착오차수경소(P＜0.05);이식적MSCs가재대서뇌조직중존활,병향사주뇌조직천이,(0.45±0.68)개MSCs표체GFAP,(0.15±0.36)개MSCs표체NSE.결론:인제혈MSCs이식비신경절감지주사교호적제고CP대서신경공능적회복,이식세포가재대서뇌결혈구역중존활、천이,병부분향성형효질세포혹신경원분화.