不同浓度丙戊酸钠对锚蛋白启动子活性的调控
불동농도병무산납대묘단백계동자활성적조공
Change of Ankyrin G Promoter Activity Following Treatment with Sodium Valproate at Different Concentrations
  • 万方数据
    中国医学科学院学报 중국의학과학원학보
    Acta Academiae Medicinae Sinicae
    2015年 5期 508-513 ,共6页

    刘翠%武杰%隋小龙%李彦红%韩云林%徐玉环%黄澜%朱华%盛树力

    류취%무걸%수소룡%리언홍%한운림%서옥배%황란%주화%성수력

    丙戊酸钠%锚蛋白%启动子 丙戊痠鈉%錨蛋白%啟動子
    병무산납%묘단백%계동자
    sodium valproate%Ankyrin G%promoter
    目的 采用体外锚蛋白(AnkG)启动子介导荧光素酶报告基因活性的研究,探讨丙戊酸钠(VPA)对AnkG启动子活性的调控机制.方法 通过对人和小鼠的AnkG启动子序列进行比对分析,克隆小鼠AnkG启动子序列;将AnkG启动子片段克隆至荧光素酶报告基因(Luciferase)质粒pGL3,构建真核表达载体;采用脂质体Lipofectamine2000将重组质粒和空载体质粒分别与pRL-CMV共转染至N2a细胞和293T细胞,同时给予0、0.5、1.0 mmol/L的VPA处理12 h后,采用双荧光素酶法检测AnkG启动子片段在细胞中的转录活性及VPA处理后细胞中荧光素酶报告基因的活性.结果 酶切和测序鉴定证实AnkG启动子克隆及其表达载体构建成功;荧光素酶活性检测显示AnkG启动子在N2a和293T细胞中均有较高的转录活性;0.5 mmol/L VPA处理两种品系细胞12h后,Luciferase活性都明显上调.结论 VPA能够从转录水平调控AnkG启动子的活性,体内VPA对AnkG表达的调控可能是直接在转录水平进行的.
    목적 채용체외묘단백(AnkG)계동자개도형광소매보고기인활성적연구,탐토병무산납(VPA)대AnkG계동자활성적조공궤제.방법 통과대인화소서적AnkG계동자서렬진행비대분석,극륭소서AnkG계동자서렬;장AnkG계동자편단극륭지형광소매보고기인(Luciferase)질립pGL3,구건진핵표체재체;채용지질체Lipofectamine2000장중조질립화공재체질립분별여pRL-CMV공전염지N2a세포화293T세포,동시급여0、0.5、1.0 mmol/L적VPA처리12 h후,채용쌍형광소매법검측AnkG계동자편단재세포중적전록활성급VPA처리후세포중형광소매보고기인적활성.결과 매절화측서감정증실AnkG계동자극륭급기표체재체구건성공;형광소매활성검측현시AnkG계동자재N2a화293T세포중균유교고적전록활성;0.5 mmol/L VPA처리량충품계세포12h후,Luciferase활성도명현상조.결론 VPA능구종전록수평조공AnkG계동자적활성,체내VPA대AnkG표체적조공가능시직접재전록수평진행적.
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