山西医科大学学报
山西醫科大學學報
산서의과대학학보
Journal of Shanxi Medical University
2015年
11期
1126-1129
,共4页
井发红%慕玉东%辛娜%李敬梅%康炜
井髮紅%慕玉東%辛娜%李敬梅%康煒
정발홍%모옥동%신나%리경매%강위
实时荧光定量PCR%血流感染%鲍曼不动杆菌%肺炎克雷伯菌%表皮葡萄球菌
實時熒光定量PCR%血流感染%鮑曼不動桿菌%肺炎剋雷伯菌%錶皮葡萄毬菌
실시형광정량PCR%혈류감염%포만불동간균%폐염극뢰백균%표피포도구균
qRT-PCR%blood stream infection%Acinetobacter baumannii%Klebsiella pneumoniae%Staphylococcus epidermidis
目的 建立一种应用于临床检测鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌和表皮葡萄球菌的实时荧光定量PCR方法. 方法 针对鲍曼不动杆菌的ITS、肺炎克雷伯菌的phoE和表皮葡萄球菌的gseA基因设计特异性引物,构建熔解曲线分析法,并进行特异性验证.检测不同拷贝浓度稀释液进行敏感性分析.利用绝对定量法测定血液及穿刺引流液中鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、表皮葡萄球菌的含量. 结果 本研究所构建熔解曲线分析法特异性好,可检测到的拷贝浓度稀释液分别为4.30×103,5.80×103,1.76×103 copy/ml.应用实时荧光定量PCR定量分析临床标本中鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌和表皮葡萄球菌的含量,结果表明血液中细菌含量在103-107 copy/ml之间,穿刺引流液中细菌含量在1O5-108 copy/ml之间. 结论 针对鲍曼不动杆菌、表皮葡萄球菌和肺炎克雷伯菌建立的实时荧光定量PCR方法具有较好的特异性、敏感性和稳定性,血液中的细菌含量较引流液中细菌含量低.
目的 建立一種應用于臨床檢測鮑曼不動桿菌、肺炎剋雷伯菌和錶皮葡萄毬菌的實時熒光定量PCR方法. 方法 針對鮑曼不動桿菌的ITS、肺炎剋雷伯菌的phoE和錶皮葡萄毬菌的gseA基因設計特異性引物,構建鎔解麯線分析法,併進行特異性驗證.檢測不同拷貝濃度稀釋液進行敏感性分析.利用絕對定量法測定血液及穿刺引流液中鮑曼不動桿菌、肺炎剋雷伯菌、錶皮葡萄毬菌的含量. 結果 本研究所構建鎔解麯線分析法特異性好,可檢測到的拷貝濃度稀釋液分彆為4.30×103,5.80×103,1.76×103 copy/ml.應用實時熒光定量PCR定量分析臨床標本中鮑曼不動桿菌、肺炎剋雷伯菌和錶皮葡萄毬菌的含量,結果錶明血液中細菌含量在103-107 copy/ml之間,穿刺引流液中細菌含量在1O5-108 copy/ml之間. 結論 針對鮑曼不動桿菌、錶皮葡萄毬菌和肺炎剋雷伯菌建立的實時熒光定量PCR方法具有較好的特異性、敏感性和穩定性,血液中的細菌含量較引流液中細菌含量低.
목적 건립일충응용우림상검측포만불동간균、폐염극뢰백균화표피포도구균적실시형광정량PCR방법. 방법 침대포만불동간균적ITS、폐염극뢰백균적phoE화표피포도구균적gseA기인설계특이성인물,구건용해곡선분석법,병진행특이성험증.검측불동고패농도희석액진행민감성분석.이용절대정량법측정혈액급천자인류액중포만불동간균、폐염극뢰백균、표피포도구균적함량. 결과 본연구소구건용해곡선분석법특이성호,가검측도적고패농도희석액분별위4.30×103,5.80×103,1.76×103 copy/ml.응용실시형광정량PCR정량분석림상표본중포만불동간균、폐염극뢰백균화표피포도구균적함량,결과표명혈액중세균함량재103-107 copy/ml지간,천자인류액중세균함량재1O5-108 copy/ml지간. 결론 침대포만불동간균、표피포도구균화폐염극뢰백균건립적실시형광정량PCR방법구유교호적특이성、민감성화은정성,혈액중적세균함량교인류액중세균함량저.