临床与实验病理学杂志
臨床與實驗病理學雜誌
림상여실험병이학잡지
Chinese Journal of Clinical and Experimental Pathology
2015年
11期
1258-1262,1266
,共6页
赵楠%孙保存%赵秀兰%孟洁%董学易%古强
趙楠%孫保存%趙秀蘭%孟潔%董學易%古彊
조남%손보존%조수란%맹길%동학역%고강
缺氧%核凝集%BCL-2
缺氧%覈凝集%BCL-2
결양%핵응집%BCL-2
hyoxia%nuclear condensation%BCL-2
目的 模拟缺氧微环境分析缺氧条件下BCL-2表达及其对核凝集形成的影响,探讨线形程序性坏死(linearly patterned programmed cell necrosis,LPPCN)样细胞核凝集形成的分子机制.方法 利用CoCl2缺氧模型模拟肿瘤细胞缺氧微环境,以B16黑色素瘤细胞系作为研究对象观察核凝集出现时肿瘤细胞的变化;利用伤口愈合实验、SRB实验评价缺氧对肿瘤细胞迁移、增殖的影响;应用Western blot和RT-PCR检测缺氧对凋亡相关分子BCL-2蛋白和RNA表达的影响;利用免疫荧光技术观察缺氧对BCL-2表达定位的影响.结果 缺氧36 ～48 h后,采用Hochest 33342活体细胞染色,荧光显微镜下可见30％以上胞核呈高度凝集状态,表现为单个凝集体或多个连接的小凝集体,未见明显的凋亡;缺氧可以明显抑制肿瘤细胞的增殖和迁移能力;在缺氧条件下,BCL-2表现出随时间变化的特征性表达谱,与肿瘤细胞核凝集出现的时间一致.结论 缺氧可诱导肿瘤细胞核凝集的形成,呈现与LPPCN细胞同样的特点;缺氧条件下存活的肿瘤细胞表现出更强的运动潜能;缺氧条件下抗凋亡蛋白BCL-2表达高峰的形成可能与核凝集有关.
目的 模擬缺氧微環境分析缺氧條件下BCL-2錶達及其對覈凝集形成的影響,探討線形程序性壞死(linearly patterned programmed cell necrosis,LPPCN)樣細胞覈凝集形成的分子機製.方法 利用CoCl2缺氧模型模擬腫瘤細胞缺氧微環境,以B16黑色素瘤細胞繫作為研究對象觀察覈凝集齣現時腫瘤細胞的變化;利用傷口愈閤實驗、SRB實驗評價缺氧對腫瘤細胞遷移、增殖的影響;應用Western blot和RT-PCR檢測缺氧對凋亡相關分子BCL-2蛋白和RNA錶達的影響;利用免疫熒光技術觀察缺氧對BCL-2錶達定位的影響.結果 缺氧36 ～48 h後,採用Hochest 33342活體細胞染色,熒光顯微鏡下可見30％以上胞覈呈高度凝集狀態,錶現為單箇凝集體或多箇連接的小凝集體,未見明顯的凋亡;缺氧可以明顯抑製腫瘤細胞的增殖和遷移能力;在缺氧條件下,BCL-2錶現齣隨時間變化的特徵性錶達譜,與腫瘤細胞覈凝集齣現的時間一緻.結論 缺氧可誘導腫瘤細胞覈凝集的形成,呈現與LPPCN細胞同樣的特點;缺氧條件下存活的腫瘤細胞錶現齣更彊的運動潛能;缺氧條件下抗凋亡蛋白BCL-2錶達高峰的形成可能與覈凝集有關.
목적 모의결양미배경분석결양조건하BCL-2표체급기대핵응집형성적영향,탐토선형정서성배사(linearly patterned programmed cell necrosis,LPPCN)양세포핵응집형성적분자궤제.방법 이용CoCl2결양모형모의종류세포결양미배경,이B16흑색소류세포계작위연구대상관찰핵응집출현시종류세포적변화;이용상구유합실험、SRB실험평개결양대종류세포천이、증식적영향;응용Western blot화RT-PCR검측결양대조망상관분자BCL-2단백화RNA표체적영향;이용면역형광기술관찰결양대BCL-2표체정위적영향.결과 결양36 ～48 h후,채용Hochest 33342활체세포염색,형광현미경하가견30％이상포핵정고도응집상태,표현위단개응집체혹다개련접적소응집체,미견명현적조망;결양가이명현억제종류세포적증식화천이능력;재결양조건하,BCL-2표현출수시간변화적특정성표체보,여종류세포핵응집출현적시간일치.결론 결양가유도종류세포핵응집적형성,정현여LPPCN세포동양적특점;결양조건하존활적종류세포표현출경강적운동잠능;결양조건하항조망단백BCL-2표체고봉적형성가능여핵응집유관.
