中华肿瘤杂志
中華腫瘤雜誌
중화종류잡지
Chinese Journal of Oncology
2015年
11期
804-809
,共6页
上官磊%厉晓杰%王哲%罗卓荆
上官磊%厲曉傑%王哲%囉卓荊
상관뢰%려효걸%왕철%라탁형
细胞系,肿瘤%转化生长因子β1%间充质干细胞%肿瘤相关成纤维细胞%细胞分化
細胞繫,腫瘤%轉化生長因子β1%間充質榦細胞%腫瘤相關成纖維細胞%細胞分化
세포계,종류%전화생장인자β1%간충질간세포%종류상관성섬유세포%세포분화
Cell line,tumor%Transforming growth factor-β1%Mesenchymal stem cells%Cancer associated fibroblasts%Cell differentiation
目的 研究转化生长因子β1(TGF-β1)在骨髓来源间充质干细胞(MSCs)向肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)分化中的作用.方法 将MSCs与肿瘤细胞条件培养基(TCM)或含TGF-β1培养基共培养后,采用逆转录定量PCR(qRT-PCR)、Western blot和免疫荧光等方法检测MSCs向CAFs分化的情况.结果 qRT-PCR检测显示,TGF-β1组中成纤维细胞活化蛋白(FAP)、肌动蛋白A(ACTA)、小窝蛋白(CAV)、细胞因子配体5(CCL5)、C-X-C趋化因子受体4(CXCR4)、成纤维细胞表面蛋白1(FSP1)、基质细胞衍生因子1(SDF-1)和波形蛋白(vimentin) mRNA的相对表达水平分别为9.92±2.16、7.76±1.28、3.04±0.95、3.28±2.16、2.13±0.71、1.41±0.66、2.25±0.86和1.38±0.56,TCM组中FAP、ACTA、CAV、CCL5、CXCR4、FSP1、SDF-1和vimentin mRNA的相对表达水平分别为7.52± 1.76、5.02± 1.18、1.98± 1.19、1.82±1.19、2.95±0.86、1.44±0.67、2.08±0.74和1.47±0.55,表明MSCs可以表达CAFs表型.TGF-β1信号通路抑制剂SB-431542可以抑制MSCs向CAFs转化.免疫荧光和Westernblot检测结果均显示,MSCs在TGF-β1和TCM作用下可表达CAFs表型.结论 TGF-β1通过上调磷酸化Smad3表达,诱导局部MSCs向CAFs分化,从而进一步促进肿瘤的生长.
目的 研究轉化生長因子β1(TGF-β1)在骨髓來源間充質榦細胞(MSCs)嚮腫瘤相關成纖維細胞(CAFs)分化中的作用.方法 將MSCs與腫瘤細胞條件培養基(TCM)或含TGF-β1培養基共培養後,採用逆轉錄定量PCR(qRT-PCR)、Western blot和免疫熒光等方法檢測MSCs嚮CAFs分化的情況.結果 qRT-PCR檢測顯示,TGF-β1組中成纖維細胞活化蛋白(FAP)、肌動蛋白A(ACTA)、小窩蛋白(CAV)、細胞因子配體5(CCL5)、C-X-C趨化因子受體4(CXCR4)、成纖維細胞錶麵蛋白1(FSP1)、基質細胞衍生因子1(SDF-1)和波形蛋白(vimentin) mRNA的相對錶達水平分彆為9.92±2.16、7.76±1.28、3.04±0.95、3.28±2.16、2.13±0.71、1.41±0.66、2.25±0.86和1.38±0.56,TCM組中FAP、ACTA、CAV、CCL5、CXCR4、FSP1、SDF-1和vimentin mRNA的相對錶達水平分彆為7.52± 1.76、5.02± 1.18、1.98± 1.19、1.82±1.19、2.95±0.86、1.44±0.67、2.08±0.74和1.47±0.55,錶明MSCs可以錶達CAFs錶型.TGF-β1信號通路抑製劑SB-431542可以抑製MSCs嚮CAFs轉化.免疫熒光和Westernblot檢測結果均顯示,MSCs在TGF-β1和TCM作用下可錶達CAFs錶型.結論 TGF-β1通過上調燐痠化Smad3錶達,誘導跼部MSCs嚮CAFs分化,從而進一步促進腫瘤的生長.
목적 연구전화생장인자β1(TGF-β1)재골수래원간충질간세포(MSCs)향종류상관성섬유세포(CAFs)분화중적작용.방법 장MSCs여종류세포조건배양기(TCM)혹함TGF-β1배양기공배양후,채용역전록정량PCR(qRT-PCR)、Western blot화면역형광등방법검측MSCs향CAFs분화적정황.결과 qRT-PCR검측현시,TGF-β1조중성섬유세포활화단백(FAP)、기동단백A(ACTA)、소와단백(CAV)、세포인자배체5(CCL5)、C-X-C추화인자수체4(CXCR4)、성섬유세포표면단백1(FSP1)、기질세포연생인자1(SDF-1)화파형단백(vimentin) mRNA적상대표체수평분별위9.92±2.16、7.76±1.28、3.04±0.95、3.28±2.16、2.13±0.71、1.41±0.66、2.25±0.86화1.38±0.56,TCM조중FAP、ACTA、CAV、CCL5、CXCR4、FSP1、SDF-1화vimentin mRNA적상대표체수평분별위7.52± 1.76、5.02± 1.18、1.98± 1.19、1.82±1.19、2.95±0.86、1.44±0.67、2.08±0.74화1.47±0.55,표명MSCs가이표체CAFs표형.TGF-β1신호통로억제제SB-431542가이억제MSCs향CAFs전화.면역형광화Westernblot검측결과균현시,MSCs재TGF-β1화TCM작용하가표체CAFs표형.결론 TGF-β1통과상조린산화Smad3표체,유도국부MSCs향CAFs분화,종이진일보촉진종류적생장.
Objective To investigate the effect of transforming growth factor-β1 (TGF-β1) on the differentiation of bone marrow-derived mesenchymal stem cells (MSCs) into cancer-associated fibroblasts (CAFs).Methods MSCs were cultured in α-MEM with recombinant human TGF-β1 or in tumorconditioned medium.The expression of CAFs markers were detected by immunofluorescence and quantitative RT-PCR.Results The qRT-PCR assay showed that the expression of CAFs markers FAP, ACTA, CAV, CCL5, CXCR4, FSP1, SDF-1 and vimentin were 9.92±2.16, 7.76±1.28, 3.04±0.95, 3.28±2.16, 2.13± 0.71, 1.41±0.66, 2.25±0.86 and 1.38±0.56, respectively, significantly upregulated in the MSCs cocultured with TGF-β1 or TCM.The relative levels of FAP, ACTA, CAV, CCL5, CXCR4, FSP1, SDF-1 and vimentin mRNA in the TCM group were 7.52±1.76, 5.02±1.18, 1.98±1.19, 1.82±1.19, 2.95±0.86, 1.44±0.67, 2.08±0.74 and 1.47±0.55, respectively, indicating that MSCs can express CAFs phenotype.TGF beta signaling pathway inhibitor SB-431542 could inhibit the differentiation.Both immunofluorescence and Western blot confirmed the above results.Conclusions TGF-β1 induces differentiation of local MSCs to CAFs by upregulating the expression of pSmad3, so as to further promote the growth of cancer cells.
