石河子大学学报（自然科学版）
石河子大學學報（自然科學版）
석하자대학학보（자연과학판）
Journal of Shihezi University(Natural Science)
2015年
5期
529-534
,共6页
袁哈利%郝晓云%郑学伟%李鸿彬
袁哈利%郝曉雲%鄭學偉%李鴻彬
원합리%학효운%정학위%리홍빈
棉花GDSL脂肪酶%黄萎病%乙烯信号%抗氧化系统酶%病程相关基因
棉花GDSL脂肪酶%黃萎病%乙烯信號%抗氧化繫統酶%病程相關基因
면화GDSL지방매%황위병%을희신호%항양화계통매%병정상관기인
cotton GDSL lipase%Verticillium dahlia%ethylene%antioxidant enzyme%pathogen related gene
为了分析脂肪酶对于黄萎病菌的抗性功能,本研究采用RT-PCR技术从陆地棉中克隆得到1个GDSL脂肪酶(GDSL Lpase,GLIP)基因GhGLIP,ORF全长1068 bp.采用滴花法将重组表达载体35S::GhGLIP转入哥伦比亚型拟南芥,通过筛选、鉴定和纯合得到T3代转基因拟南芥.利用黄萎病菌悬浮液分别对野生型和转基因拟南芥植株叶片进行局部处理后,发现转GhGLIP基因拟南芥植株能够抑制黄萎病菌诱发的叶片细胞死亡及病菌在叶片感染处的生长繁殖.酶活性测定结果显示,转GhGLIP基因拟南芥植株的抗氧化系统酶和病程相关酶的表达获得了显著的增强;RT-PCR分析结果表明,黄萎病菌处理1 d后,转GhGLIP基因拟南芥叶片的病程相关基因和乙烯信号相关基因的表达获得了显著的增加.本研究结果表明,棉花GhGLIP基因可能通过参与乙烯信号,以及促进抗氧化系统酶和病程相关基因的表达,进一步增强拟南芥对于黄萎病菌的抗性.本研究可为棉花GhGLIP基因增强植物抗病性分子机制解析,以及进一步的基因工程利用提供一定参考.
為瞭分析脂肪酶對于黃萎病菌的抗性功能,本研究採用RT-PCR技術從陸地棉中剋隆得到1箇GDSL脂肪酶(GDSL Lpase,GLIP)基因GhGLIP,ORF全長1068 bp.採用滴花法將重組錶達載體35S::GhGLIP轉入哥倫比亞型擬南芥,通過篩選、鑒定和純閤得到T3代轉基因擬南芥.利用黃萎病菌懸浮液分彆對野生型和轉基因擬南芥植株葉片進行跼部處理後,髮現轉GhGLIP基因擬南芥植株能夠抑製黃萎病菌誘髮的葉片細胞死亡及病菌在葉片感染處的生長繁殖.酶活性測定結果顯示,轉GhGLIP基因擬南芥植株的抗氧化繫統酶和病程相關酶的錶達穫得瞭顯著的增彊;RT-PCR分析結果錶明,黃萎病菌處理1 d後,轉GhGLIP基因擬南芥葉片的病程相關基因和乙烯信號相關基因的錶達穫得瞭顯著的增加.本研究結果錶明,棉花GhGLIP基因可能通過參與乙烯信號,以及促進抗氧化繫統酶和病程相關基因的錶達,進一步增彊擬南芥對于黃萎病菌的抗性.本研究可為棉花GhGLIP基因增彊植物抗病性分子機製解析,以及進一步的基因工程利用提供一定參攷.
위료분석지방매대우황위병균적항성공능,본연구채용RT-PCR기술종륙지면중극륭득도1개GDSL지방매(GDSL Lpase,GLIP)기인GhGLIP,ORF전장1068 bp.채용적화법장중조표체재체35S::GhGLIP전입가륜비아형의남개,통과사선、감정화순합득도T3대전기인의남개.이용황위병균현부액분별대야생형화전기인의남개식주협편진행국부처리후,발현전GhGLIP기인의남개식주능구억제황위병균유발적협편세포사망급병균재협편감염처적생장번식.매활성측정결과현시,전GhGLIP기인의남개식주적항양화계통매화병정상관매적표체획득료현저적증강;RT-PCR분석결과표명,황위병균처리1 d후,전GhGLIP기인의남개협편적병정상관기인화을희신호상관기인적표체획득료현저적증가.본연구결과표명,면화GhGLIP기인가능통과삼여을희신호,이급촉진항양화계통매화병정상관기인적표체,진일보증강의남개대우황위병균적항성.본연구가위면화GhGLIP기인증강식물항병성분자궤제해석,이급진일보적기인공정이용제공일정삼고.
