CAJ | 학술논문

目的:研究氯化镉(CdC12)暴露对人乳腺癌细胞ZR75-1 DNA错配修复(DNA MMR)活性的影响.方法:用0、10、20、30、40、50μmol/L的CdC12对ZR75-1细胞染毒48 h和72 h后,用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法检测各组ZR75-1细胞的存活率.以5、10、15 μmol/L的CdC12分别作用于ZR75-1细胞48 h后,各组平行转染同源、异源质粒,通过流式细胞术检测相对荧光表达率来评估各组ZR75-1细胞的DNA MMR活性;同时利用实时荧光定量PCR技术检测CdC12暴露后DNA MMR活性相关基因MLH1、MSH2、MSH6、PMS1 mRNA的表达.结果:MTT结果显示,与对照组相比,10、20 μmol/L CdCl2对ZR75-1细胞的存活率无显著影响(P＞ 0.05),而30、40、50μmol/L CdC12对细胞有显著毒性作用(P＜o.05),且表现出浓度和时间依赖效应.流式细胞术检测显示,与对照组相比,5、10、15 μmol/L CdC12暴露均显著降低了ZR75-1细胞的DNA MMR活性(P＜ 0.05).荧光定量PCR技术检测结果显示,5、10、15μmol/L CdCl2处理组中MLH1、MSH2、MSH6、PMS1 mRNA表达水平总体上升,变化趋势均为随CdCl2暴露浓度增加先上升后下降.结论:对细胞存活率无影响的CdC12暴露可显著抑制ZR75-1细胞的DNA MMR活性,并上调DNA MMR活性相关基因MLH1、MSH2、MSH6、PMS1 mRNA的表达水平.
목적:연구록화력(CdC12)폭로대인유선암세포ZR75-1 DNA착배수복(DNA MMR)활성적영향.방법:용0、10、20、30、40、50μmol/L적CdC12대ZR75-1세포염독48 h화72 h후,용3-(4,5-이갑기새서-2)-2,5-이분기사담서추염(MTT)법검측각조ZR75-1세포적존활솔.이5、10、15 μmol/L적CdC12분별작용우ZR75-1세포48 h후,각조평행전염동원、이원질립,통과류식세포술검측상대형광표체솔래평고각조ZR75-1세포적DNA MMR활성;동시이용실시형광정량PCR기술검측CdC12폭로후DNA MMR활성상관기인MLH1、MSH2、MSH6、PMS1 mRNA적표체.결과:MTT결과현시,여대조조상비,10、20 μmol/L CdCl2대ZR75-1세포적존활솔무현저영향(P＞ 0.05),이30、40、50μmol/L CdC12대세포유현저독성작용(P＜o.05),차표현출농도화시간의뢰효응.류식세포술검측현시,여대조조상비,5、10、15 μmol/L CdC12폭로균현저강저료ZR75-1세포적DNA MMR활성(P＜ 0.05).형광정량PCR기술검측결과현시,5、10、15μmol/L CdCl2처리조중MLH1、MSH2、MSH6、PMS1 mRNA표체수평총체상승,변화추세균위수CdCl2폭로농도증가선상승후하강.결론:대세포존활솔무영향적CdC12폭로가현저억제ZR75-1세포적DNA MMR활성,병상조DNA MMR활성상관기인MLH1、MSH2、MSH6、PMS1 mRNA적표체수평.