中国医药工业杂志
中國醫藥工業雜誌
중국의약공업잡지
Chinese Journal of Pharmaceuticals
2015年
11期
1173-1177
,共5页
陈怡斐%李茜茜%荣绍丰%吕思涵
陳怡斐%李茜茜%榮紹豐%呂思涵
진이비%리천천%영소봉%려사함
兽疫链球菌%透明质酸酶%透明质酸%温控表达%包涵体复性
獸疫鏈毬菌%透明質痠酶%透明質痠%溫控錶達%包涵體複性
수역련구균%투명질산매%투명질산%온공표체%포함체복성
Streptococcus zooepidemicus%hyaluronidase%hyaluronic acid%temperature-inducible expression%renaturation of inclusion body
以兽疫链球菌(Streptococcus zooepidemicus MF002)基因组为模板,利用PCR方法扩增透明质酸酶编码基因(hyl),将其插入温敏型质粒pBLMVL2,并导入大肠杆菌(Escherichia coli BL21),获得高效表达重组透明质酸酶的基因工程菌MF005.升温诱导试验和SDS-PAGE结果表明,重组蛋白的相对分子量约9.7×104,最适诱导表达温度为41.5℃.经过包涵体复性等步骤获得的粗酶液具有透明质酸水解活性,比活力为2.3× 106 u/mg,最适反应温度为37℃,最适反应pH值为5.5.
以獸疫鏈毬菌(Streptococcus zooepidemicus MF002)基因組為模闆,利用PCR方法擴增透明質痠酶編碼基因(hyl),將其插入溫敏型質粒pBLMVL2,併導入大腸桿菌(Escherichia coli BL21),穫得高效錶達重組透明質痠酶的基因工程菌MF005.升溫誘導試驗和SDS-PAGE結果錶明,重組蛋白的相對分子量約9.7×104,最適誘導錶達溫度為41.5℃.經過包涵體複性等步驟穫得的粗酶液具有透明質痠水解活性,比活力為2.3× 106 u/mg,最適反應溫度為37℃,最適反應pH值為5.5.
이수역련구균(Streptococcus zooepidemicus MF002)기인조위모판,이용PCR방법확증투명질산매편마기인(hyl),장기삽입온민형질립pBLMVL2,병도입대장간균(Escherichia coli BL21),획득고효표체중조투명질산매적기인공정균MF005.승온유도시험화SDS-PAGE결과표명,중조단백적상대분자량약9.7×104,최괄유도표체온도위41.5℃.경과포함체복성등보취획득적조매액구유투명질산수해활성,비활력위2.3× 106 u/mg,최괄반응온도위37℃,최괄반응pH치위5.5.
