中山大学学报(医学科学版)
中山大學學報(醫學科學版)
중산대학학보(의학과학판)
Journal of Sun Yat-sen University(Medical Sciences)
2015年
6期
809-815
,共7页
唐晶%苏畅%赖淑萍%戚永磊%冯春%邹外一%陈惠珍%王荷花%许多荣
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당정%소창%뢰숙평%척영뢰%풍춘%추외일%진혜진%왕하화%허다영
异基因造血干细胞移植%植入功能不良%PGE2受体%PGE2受体激动剂%增殖
異基因造血榦細胞移植%植入功能不良%PGE2受體%PGE2受體激動劑%增殖
이기인조혈간세포이식%식입공능불량%PGE2수체%PGE2수체격동제%증식
Allo-HSCT%poor graft function%PGE2 receptor%PGE2 receptor agonist%proliferation
[目的]明确介导前列腺素E2(PGE2)促进人CD34+细胞增殖的具体受体亚型.[方法]收集2013年6月至2014年10月期间18例健康志愿者经G-CSF动员的外周血,采用免疫磁珠法分选人CD34+细胞,并用流式细胞术鉴定其纯度;用qRT-PCR检测经PGE2作用后的人CD34+细胞中PGE2四个亚受体(EP1~EP4)mRNA表达情况;根据处理方法不同,将人CD34+细胞分为对照组、前列腺素E2(PGE2)组、前列腺素E2受体EP2激动剂(EP2A)组、EP2A+前列腺素E2受体EP2拮抗剂(EP2AA)组、前列腺素E2受体EP4激动剂(EP4A)组及EP4A+前列腺素E2受体EP4拮抗剂(EP4AA)组,每组3例,分别接受上述组药物处理,采用集落形成实验检测红系集落形成单位CFU-E、红系爆式集落形成单位BFU-E、粒系集落形成单位CFU-G、单核系集落形成单位CFU-M、粒-单核系集落形成单位CFU-GM及粒、红、单核、巨核系集落形成单位CFU-GEMM集落形成情况;用流式细胞术检测细胞周期分布;用Real time-PCR检测CD34+细胞内survivin-mRNA水平、Western blot检测胞浆内β-catenin和survivin蛋白表达情况.[结果]人CD34+细胞可表达PGE2的四个亚受体,但主要表达受体EP2和EP4;PGE2作用后,EP2和EP4 mRNA表达量较对照组明显升高,而EP1和EP3的mRNA表达变化不明显;EP4A可促进人CD34+细胞各系造血集落形成;EP4可促进人CD34+细胞进入细胞周期,使G2/M期比例增加;EP4A可促进凋亡抑制蛋白survivin的mRNA和蛋白表达、β-catenin蛋白表达.[结论]前列腺素E2体外主要通过受体EP4促进人CD34+细胞增殖.
[目的]明確介導前列腺素E2(PGE2)促進人CD34+細胞增殖的具體受體亞型.[方法]收集2013年6月至2014年10月期間18例健康誌願者經G-CSF動員的外週血,採用免疫磁珠法分選人CD34+細胞,併用流式細胞術鑒定其純度;用qRT-PCR檢測經PGE2作用後的人CD34+細胞中PGE2四箇亞受體(EP1~EP4)mRNA錶達情況;根據處理方法不同,將人CD34+細胞分為對照組、前列腺素E2(PGE2)組、前列腺素E2受體EP2激動劑(EP2A)組、EP2A+前列腺素E2受體EP2拮抗劑(EP2AA)組、前列腺素E2受體EP4激動劑(EP4A)組及EP4A+前列腺素E2受體EP4拮抗劑(EP4AA)組,每組3例,分彆接受上述組藥物處理,採用集落形成實驗檢測紅繫集落形成單位CFU-E、紅繫爆式集落形成單位BFU-E、粒繫集落形成單位CFU-G、單覈繫集落形成單位CFU-M、粒-單覈繫集落形成單位CFU-GM及粒、紅、單覈、巨覈繫集落形成單位CFU-GEMM集落形成情況;用流式細胞術檢測細胞週期分佈;用Real time-PCR檢測CD34+細胞內survivin-mRNA水平、Western blot檢測胞漿內β-catenin和survivin蛋白錶達情況.[結果]人CD34+細胞可錶達PGE2的四箇亞受體,但主要錶達受體EP2和EP4;PGE2作用後,EP2和EP4 mRNA錶達量較對照組明顯升高,而EP1和EP3的mRNA錶達變化不明顯;EP4A可促進人CD34+細胞各繫造血集落形成;EP4可促進人CD34+細胞進入細胞週期,使G2/M期比例增加;EP4A可促進凋亡抑製蛋白survivin的mRNA和蛋白錶達、β-catenin蛋白錶達.[結論]前列腺素E2體外主要通過受體EP4促進人CD34+細胞增殖.
[목적]명학개도전렬선소E2(PGE2)촉진인CD34+세포증식적구체수체아형.[방법]수집2013년6월지2014년10월기간18례건강지원자경G-CSF동원적외주혈,채용면역자주법분선인CD34+세포,병용류식세포술감정기순도;용qRT-PCR검측경PGE2작용후적인CD34+세포중PGE2사개아수체(EP1~EP4)mRNA표체정황;근거처리방법불동,장인CD34+세포분위대조조、전렬선소E2(PGE2)조、전렬선소E2수체EP2격동제(EP2A)조、EP2A+전렬선소E2수체EP2길항제(EP2AA)조、전렬선소E2수체EP4격동제(EP4A)조급EP4A+전렬선소E2수체EP4길항제(EP4AA)조,매조3례,분별접수상술조약물처리,채용집락형성실험검측홍계집락형성단위CFU-E、홍계폭식집락형성단위BFU-E、립계집락형성단위CFU-G、단핵계집락형성단위CFU-M、립-단핵계집락형성단위CFU-GM급립、홍、단핵、거핵계집락형성단위CFU-GEMM집락형성정황;용류식세포술검측세포주기분포;용Real time-PCR검측CD34+세포내survivin-mRNA수평、Western blot검측포장내β-catenin화survivin단백표체정황.[결과]인CD34+세포가표체PGE2적사개아수체,단주요표체수체EP2화EP4;PGE2작용후,EP2화EP4 mRNA표체량교대조조명현승고,이EP1화EP3적mRNA표체변화불명현;EP4A가촉진인CD34+세포각계조혈집락형성;EP4가촉진인CD34+세포진입세포주기,사G2/M기비례증가;EP4A가촉진조망억제단백survivin적mRNA화단백표체、β-catenin단백표체.[결론]전렬선소E2체외주요통과수체EP4촉진인CD34+세포증식.