中国血吸虫病防治杂志
中國血吸蟲病防治雜誌
중국혈흡충병방치잡지
Chinese Journal of Schistosomiasis Control
2015年
5期
490-496
,共7页
粉尘螨%ProDer f 1蛋白%水解%哮喘%免疫治疗
粉塵螨%ProDer f 1蛋白%水解%哮喘%免疫治療
분진만%ProDer f 1단백%수해%효천%면역치료
Dermatophagoides farinae%ProDer f1 protein%Hydrolysis%Asthma%Immunotherapy
目的 探讨粉尘螨1类变应原(ProDer f 1)两种酶解产物(木瓜蛋白酶水解产物、胰蛋白酶水解产物)对过敏性哮喘特异性免疫治疗的效果.方法 50只6～8周龄的SPF雌性小鼠随机分为磷酸盐缓冲液(PBS)组、哮喘组、ProDerf1蛋白治疗组、木瓜蛋白酶水解产物免疫治疗组和胰蛋白酶水解产物免疫治疗组5组,每组各10只.用纯化的ProDerf1蛋白于第0、7、14天腹腔注射致敏小鼠,第21天开始雾化吸入激发、连续7d.各免疫治疗组于第25～27天雾化前30 min分别用ProDe rf1蛋白和其酶解产物进行特异性免疫治疗,PBS组用PBS进行腹腔注射和雾化激发.最后一次雾化激发后24 h内,各组小鼠引颈处死.观察各组小鼠肺组织病理变化,ELISA测定支气管肺泡灌洗液(BALF)和脾细胞培养上清中IL-4、IL-10、IL-17和IFN-γ含量及血清特异性抗体IgE 、IgG2a水平.结果 各免疫治疗组对ProDerf1哮喘小鼠进行免疫治疗后,肺组织切片观察表明:酶解产物治疗组和ProDerf 1蛋白治疗组变态反应性炎症较哮喘组显著减轻,且炎性细胞浸润较哮喘组也显著减少,气道上皮结构与PBS组相近.ProDerf1蛋白治疗组、木瓜蛋白酶水解产物免疫治疗组、胰蛋白酶水解产物免疫治疗组和哮喘组小鼠BALF中的IL-4含量分别为(231.61±11.73)、(206.20±14.33)、(200.44±9.34)、(299.68±12.46) pg/ml,IL-10含量分别为(361.87±13.62) 、(376.27±20.57)、(413.57±12.98)、(171.28±19.79)pg/ml,IL-17含量为(142.12±5.01)、(128.27±5.34)、(130.79±6.30)、 (273.59±11.56) pg/ml,IFN-γ含量为(229.60±11.32)、(269.13±11.98)、(282.25±19.65)、(147.76±11.36) pg/ml;各治疗组和哮喘组小鼠脾细胞分泌因子IL-4含量分别为(218.54±12.62)、(220.21±10.73)、(201.59±18.54)、(256.86±15.53) pg/ml,IL-10含量分别为(360.45±13.10)、(383.41±19.81)、(413.51±13.14)、(173.50±20.25) pg/ml,IL-17含量为(154.23±5.18)、(137.72±6.66)、(141.01±7.35)、(297.55±8.97) pg/ml,IFN-γ含量为(243.22±25.01)、(275.20±14.65)、(284.67±25.87)、(154.54±17.45) pg/ml;各治疗组和哮喘组小鼠血清中IgE抗体含量分别为(309.66±13.56)、(256.61±40.64)、(248.83±10.51)、(359.60±29.48) μg/ml,IgG2a抗体含量分别为(8.87±0.82)、(9.15±0.83)、(10.56±1.68)、(7.04±0.42) μg/ml.各免疫治疗组血清抗原特异性IgE抗体、BALF和脾细胞分泌的IL-4、IL-17均比哮喘组低;血清抗原特异性抗体IgG2a、BALF和脾细胞培养上清中IFN-γ、IL-10含量均比哮喘组高.结论 应用上述两种蛋白酶水解产物对小鼠哮喘模型进行特异性免疫治疗,可有效改善由ProDer f 1蛋白致敏的小鼠变态反应性气道及肺部炎症.
目的 探討粉塵螨1類變應原(ProDer f 1)兩種酶解產物(木瓜蛋白酶水解產物、胰蛋白酶水解產物)對過敏性哮喘特異性免疫治療的效果.方法 50隻6～8週齡的SPF雌性小鼠隨機分為燐痠鹽緩遲液(PBS)組、哮喘組、ProDerf1蛋白治療組、木瓜蛋白酶水解產物免疫治療組和胰蛋白酶水解產物免疫治療組5組,每組各10隻.用純化的ProDerf1蛋白于第0、7、14天腹腔註射緻敏小鼠,第21天開始霧化吸入激髮、連續7d.各免疫治療組于第25～27天霧化前30 min分彆用ProDe rf1蛋白和其酶解產物進行特異性免疫治療,PBS組用PBS進行腹腔註射和霧化激髮.最後一次霧化激髮後24 h內,各組小鼠引頸處死.觀察各組小鼠肺組織病理變化,ELISA測定支氣管肺泡灌洗液(BALF)和脾細胞培養上清中IL-4、IL-10、IL-17和IFN-γ含量及血清特異性抗體IgE 、IgG2a水平.結果 各免疫治療組對ProDerf1哮喘小鼠進行免疫治療後,肺組織切片觀察錶明:酶解產物治療組和ProDerf 1蛋白治療組變態反應性炎癥較哮喘組顯著減輕,且炎性細胞浸潤較哮喘組也顯著減少,氣道上皮結構與PBS組相近.ProDerf1蛋白治療組、木瓜蛋白酶水解產物免疫治療組、胰蛋白酶水解產物免疫治療組和哮喘組小鼠BALF中的IL-4含量分彆為(231.61±11.73)、(206.20±14.33)、(200.44±9.34)、(299.68±12.46) pg/ml,IL-10含量分彆為(361.87±13.62) 、(376.27±20.57)、(413.57±12.98)、(171.28±19.79)pg/ml,IL-17含量為(142.12±5.01)、(128.27±5.34)、(130.79±6.30)、 (273.59±11.56) pg/ml,IFN-γ含量為(229.60±11.32)、(269.13±11.98)、(282.25±19.65)、(147.76±11.36) pg/ml;各治療組和哮喘組小鼠脾細胞分泌因子IL-4含量分彆為(218.54±12.62)、(220.21±10.73)、(201.59±18.54)、(256.86±15.53) pg/ml,IL-10含量分彆為(360.45±13.10)、(383.41±19.81)、(413.51±13.14)、(173.50±20.25) pg/ml,IL-17含量為(154.23±5.18)、(137.72±6.66)、(141.01±7.35)、(297.55±8.97) pg/ml,IFN-γ含量為(243.22±25.01)、(275.20±14.65)、(284.67±25.87)、(154.54±17.45) pg/ml;各治療組和哮喘組小鼠血清中IgE抗體含量分彆為(309.66±13.56)、(256.61±40.64)、(248.83±10.51)、(359.60±29.48) μg/ml,IgG2a抗體含量分彆為(8.87±0.82)、(9.15±0.83)、(10.56±1.68)、(7.04±0.42) μg/ml.各免疫治療組血清抗原特異性IgE抗體、BALF和脾細胞分泌的IL-4、IL-17均比哮喘組低;血清抗原特異性抗體IgG2a、BALF和脾細胞培養上清中IFN-γ、IL-10含量均比哮喘組高.結論 應用上述兩種蛋白酶水解產物對小鼠哮喘模型進行特異性免疫治療,可有效改善由ProDer f 1蛋白緻敏的小鼠變態反應性氣道及肺部炎癥.
목적 탐토분진만1류변응원(ProDer f 1)량충매해산물(목과단백매수해산물、이단백매수해산물)대과민성효천특이성면역치료적효과.방법 50지6～8주령적SPF자성소서수궤분위린산염완충액(PBS)조、효천조、ProDerf1단백치료조、목과단백매수해산물면역치료조화이단백매수해산물면역치료조5조,매조각10지.용순화적ProDerf1단백우제0、7、14천복강주사치민소서,제21천개시무화흡입격발、련속7d.각면역치료조우제25～27천무화전30 min분별용ProDe rf1단백화기매해산물진행특이성면역치료,PBS조용PBS진행복강주사화무화격발.최후일차무화격발후24 h내,각조소서인경처사.관찰각조소서폐조직병리변화,ELISA측정지기관폐포관세액(BALF)화비세포배양상청중IL-4、IL-10、IL-17화IFN-γ함량급혈청특이성항체IgE 、IgG2a수평.결과 각면역치료조대ProDerf1효천소서진행면역치료후,폐조직절편관찰표명:매해산물치료조화ProDerf 1단백치료조변태반응성염증교효천조현저감경,차염성세포침윤교효천조야현저감소,기도상피결구여PBS조상근.ProDerf1단백치료조、목과단백매수해산물면역치료조、이단백매수해산물면역치료조화효천조소서BALF중적IL-4함량분별위(231.61±11.73)、(206.20±14.33)、(200.44±9.34)、(299.68±12.46) pg/ml,IL-10함량분별위(361.87±13.62) 、(376.27±20.57)、(413.57±12.98)、(171.28±19.79)pg/ml,IL-17함량위(142.12±5.01)、(128.27±5.34)、(130.79±6.30)、 (273.59±11.56) pg/ml,IFN-γ함량위(229.60±11.32)、(269.13±11.98)、(282.25±19.65)、(147.76±11.36) pg/ml;각치료조화효천조소서비세포분비인자IL-4함량분별위(218.54±12.62)、(220.21±10.73)、(201.59±18.54)、(256.86±15.53) pg/ml,IL-10함량분별위(360.45±13.10)、(383.41±19.81)、(413.51±13.14)、(173.50±20.25) pg/ml,IL-17함량위(154.23±5.18)、(137.72±6.66)、(141.01±7.35)、(297.55±8.97) pg/ml,IFN-γ함량위(243.22±25.01)、(275.20±14.65)、(284.67±25.87)、(154.54±17.45) pg/ml;각치료조화효천조소서혈청중IgE항체함량분별위(309.66±13.56)、(256.61±40.64)、(248.83±10.51)、(359.60±29.48) μg/ml,IgG2a항체함량분별위(8.87±0.82)、(9.15±0.83)、(10.56±1.68)、(7.04±0.42) μg/ml.각면역치료조혈청항원특이성IgE항체、BALF화비세포분비적IL-4、IL-17균비효천조저;혈청항원특이성항체IgG2a、BALF화비세포배양상청중IFN-γ、IL-10함량균비효천조고.결론 응용상술량충단백매수해산물대소서효천모형진행특이성면역치료,가유효개선유ProDer f 1단백치민적소서변태반응성기도급폐부염증.
