分析化学
分析化學
분석화학
CHINESE JOURNAL OF ANALYTICAL CHEMISTRY
2007年
11期
1581-1585
,共5页
溶胶凝胶%壳聚糖-硅基杂化凝胶%金属螯合亲和层析%蛋白纯化
溶膠凝膠%殼聚糖-硅基雜化凝膠%金屬螯閤親和層析%蛋白純化
용효응효%각취당-규기잡화응효%금속오합친화층석%단백순화
采用溶胶凝胶及微乳液技术制备了以壳聚糖-硅基杂化材料为骨架并带有金属离子螯合官能团的球形基质(CSHB),并对该基质的制备条件及结构形貌进行了研究与表征.实验表明,当微乳液反应体系的组分为:100 mL壳聚糖溶液(2% m/V)、100 mL Span乳化剂、250 mL环己烷、13.3 mL四乙氧基硅烷(TEOS)、1.33 mL 3-缩水甘油丙氧基三甲氧基硅烷(GPTMS)和亚氨基二乙酸(IDA)0.802 g时,可获得粒径均匀,刚性较好的微球.红外光谱证明了该基质是一种多组分的杂合材料,差热分析数据表明该杂合材料的热稳定性随反应体系中GPTMS的含量增加而增大.CSHB通过动态吸附金属离子Cu2+与Ni2+后,可对金属螯合蛋白产生配位吸附作用.Cu2+-CSHB柱对牛血清蛋白(BSA)具良好的可逆吸附能力,蛋白能被咪唑等金属离子螯合剂洗脱,回收率达76.6%.BSA在CSHB柱上的吸附率只有4.7%,表明CSHB对蛋白的非特异吸附较低.Ni2-CSHB柱对过氧化氢酶(CAT)也显示出初步的纯化效果,一步纯化倍数为2.43倍.该基质有望用于具有组氨酸纯化标签的基因工程表达蛋白的分离与纯化.
採用溶膠凝膠及微乳液技術製備瞭以殼聚糖-硅基雜化材料為骨架併帶有金屬離子螯閤官能糰的毬形基質(CSHB),併對該基質的製備條件及結構形貌進行瞭研究與錶徵.實驗錶明,噹微乳液反應體繫的組分為:100 mL殼聚糖溶液(2% m/V)、100 mL Span乳化劑、250 mL環己烷、13.3 mL四乙氧基硅烷(TEOS)、1.33 mL 3-縮水甘油丙氧基三甲氧基硅烷(GPTMS)和亞氨基二乙痠(IDA)0.802 g時,可穫得粒徑均勻,剛性較好的微毬.紅外光譜證明瞭該基質是一種多組分的雜閤材料,差熱分析數據錶明該雜閤材料的熱穩定性隨反應體繫中GPTMS的含量增加而增大.CSHB通過動態吸附金屬離子Cu2+與Ni2+後,可對金屬螯閤蛋白產生配位吸附作用.Cu2+-CSHB柱對牛血清蛋白(BSA)具良好的可逆吸附能力,蛋白能被咪唑等金屬離子螯閤劑洗脫,迴收率達76.6%.BSA在CSHB柱上的吸附率隻有4.7%,錶明CSHB對蛋白的非特異吸附較低.Ni2-CSHB柱對過氧化氫酶(CAT)也顯示齣初步的純化效果,一步純化倍數為2.43倍.該基質有望用于具有組氨痠純化標籤的基因工程錶達蛋白的分離與純化.
채용용효응효급미유액기술제비료이각취당-규기잡화재료위골가병대유금속리자오합관능단적구형기질(CSHB),병대해기질적제비조건급결구형모진행료연구여표정.실험표명,당미유액반응체계적조분위:100 mL각취당용액(2% m/V)、100 mL Span유화제、250 mL배기완、13.3 mL사을양기규완(TEOS)、1.33 mL 3-축수감유병양기삼갑양기규완(GPTMS)화아안기이을산(IDA)0.802 g시,가획득립경균균,강성교호적미구.홍외광보증명료해기질시일충다조분적잡합재료,차열분석수거표명해잡합재료적열은정성수반응체계중GPTMS적함량증가이증대.CSHB통과동태흡부금속리자Cu2+여Ni2+후,가대금속오합단백산생배위흡부작용.Cu2+-CSHB주대우혈청단백(BSA)구량호적가역흡부능력,단백능피미서등금속리자오합제세탈,회수솔체76.6%.BSA재CSHB주상적흡부솔지유4.7%,표명CSHB대단백적비특이흡부교저.Ni2-CSHB주대과양화경매(CAT)야현시출초보적순화효과,일보순화배수위2.43배.해기질유망용우구유조안산순화표첨적기인공정표체단백적분리여순화.
